1、高血压病患者 ACE第 29 卷第 1 期20o8 年 2 月同济大学(医学版)JOURNALOFTONGJIUNIVERSITY(MEDICALSCIENCE)V0J.29No.1Feb.,2008高血压病患者 ACEI/D 基因多态性与胰岛素抵抗的关系?临床研究?皮林,华琦,陈彪 2(1.首都医科大学附属宣武医院心内科,北京 100053;2.首都医科大学附属宣武医院老年病研究所,北京 100053)【摘要】目的研究高血压病患者血管紧张素转换酶(angiotensinconvertingenzyrne,ACE)基因 I/D 多态性与胰岛素抵抗的关系.方法用 PCR 方法检测 300 例汉族
2、原发性高血压(essentialhypertension,EH)患者 ACE 基因 I/D多态性,并做空腹血糖,空腹胰岛素(fastinginsulin,FIN)检测,根据 ACE 基因 I/D 多态性分组比较胰岛素抵抗情况,再根据胰岛素抵抗情况分组比较 I/D 多态性分布情况.结果 DD 和 ID 型的胰岛素抵抗指数(10MA IR)显着高于型,DD 型 FIN 显着高于型.EH 胰岛素抵抗组 DD 型频率显着高于 EH无胰岛素抵抗组.EH 胰岛素抵抗组 D 等位基因频率显着高于 EH 无胰岛素抵抗组.结论高血压病患者胰岛素抵抗情况与 ACE 基因 I/D 多态性有关,D 等位基因为胰岛素抵
3、抗的危险因素.【关键词】血管紧张素转换酶基因;原发性高血压;胰岛素抵抗【中图分类号】R544.1【文献标识码】A【文章编号 】10080392(2008)01 005903Associationbetweenpolymorphismofangiotensinconvertingenzymegeneandtheinsulinresistanceinpatientswithessentialhypertension.PILin,HUAQi,CHENBiao(1.Dept.ofCardiology,XuanwuHospital,CapitalUniversityofMedicalScience,Be
4、ijing100053,China;2.Dept.ofGeriatricsResearch,XuanwuHospital,CapitalUniversityofMedicalScience,Beiiing100053,China)【Abstract】ObjectiveToexploretheassociationbetweeninsertion/deficiency(I/D)polymorphismofangotensinconvertingenzymegene(ACEG)andinsulinresistance(IR)inpatientswithessentialhypertension(E
5、H).MethodsI/DpolymorphismofACEGweretestedbymeansofPCRin300HanpatientswithEH.Fastingbloodglucoseandfastinginsulin(FIN)weremeasured.Insulinresistanceindexes(HOMA-IR)werecalculated.ThelevelofHOMA-IRandFINwereanalyzed.AccordingtothelevelofHOMA-IR,allobjectsweredividedintoIRgroupandwithoutIRgroup.Thefreq
6、uencyofIallele,DalleleandthefrequencyofIDgenotype,IIgenotype,DDgenotypewereanalyzedintwogroups.ResultsHOMA-IRofACEDDgroupandACE-IDgroupweresignificantlyhigherthanthatofACE.-IIgroupandFINofACE-?DDWassignificantlyhigherthanthatofACEII.ThefrequencyofACEDDofEHpatientswithIRWassignificantlyhigherthanthat
7、ofEHpatientswithoutIR.ThefrequencyofDalleleofEHpatientswithIRWassignificantlyhigherthanthatofEHpatientswithoutIR.ConclusionThedatasuggestthatACEgeneI/Dpolymorphismiscorrelated收稿日期:20061211作者简介:皮林(1973 一), 女 ,主治医师,博士.E.mial:?59?同济大学(医学版) 第 29 卷withinsulinresistanceinElipatients.Dallelemaybeariskfacto
8、rofinsulinresistanceinElipatients【Keywords】 angiotensinconvertingenzymegene;essentialhypertension;insulinresistance现代观点,高血压不仅是血流动力学异常性疾病,同时也是代谢紊乱性疾病,尤其是胰岛素抵抗在原发性高血压中普遍存在,并在高血压代谢紊乱的中心环节起作用,胰岛素抵抗是原发性高血压 es-sentialhypertension,EH)的基本缺陷 ,而且是一种多基因遗传状态,因而导致胰岛素抵抗的因素是否在基因水平与之有关亦为人们所关注.本研究将把ACEI/D 基因多态性与胰岛素抵
9、抗的关联作详细的分析.1 资料与方法1.1 研究对象选择 1998 年 6 月至 2003 年 3 月心内科门诊就诊的未曾服用降压药物的汉族高血压病患者 300例,均符合 1999 年 WHO/ISH 的高血压诊断标准.血压18.62/11.97kPa,其中男 136 例,女 164 例,年龄 3878 岁,体质量指数(bodymassindex,BMI)(26.133.52)kg/m2.血压(20.181.42/13.020.86)kPa,病程 0.525 年.I 级 147 例(49%),级 130 例(43.3%),11 级 23 例(7.7%). 经问病史,体检,实验室检查和心电图排除
10、继发性高血压,心脏瓣膜病,心肌病,肺心病,糖尿病及肝肾功能障碍等,均接受血压,空腹血糖,空腹胰岛素检查以及基因型检测.1.2 研究方法1.2.1ACE 基因 I/D 多态性检查方法取肘静脉血 35ml,加 2%EDTA 抗凝.用低渗法分离白细胞.用酚/氯仿法提取基因组 DNA.按 Right 设计的方法确定 ACE 基因型,引物 1 顺序为:5 一 1GGAGACCACTCCCATCCTTTCT 一 3.引物 2 顺序为:5 一 GATGTGGCCATCACATTCrCAGAT-3 反应终末体积为 25l,其中两种引物分别为 7pmol,MgC12 终浓度为 2.5mmol/L,KCl 终浓度
11、为50mmol/L,TrisHCl 终浓度为 20mmol/L,dNTPs混合物终浓度为 0.2mmol/L,TaqDNA 多聚酶为1.3U.94预变性 5min,94变性 30S,53退火 30S,72延伸 45S,25 个循环 ,72最后延伸10min.PCR 产物点样于含溴乙淀的 1.5%琼脂糖?60?凝胶中进行电泳(140v)2omin,在紫外灯下检测并照相.TaqDNA 多聚酶为北大医院产品 .引物购于北京奥科生物公司.1.2.2 血糖和胰岛素测定采用 125IInsulin 标记物放免法进行胰岛素测定,血糖检测取静脉血采用日立 7170 型全自动生化仪进行.1.2.3 胰岛素抵抗的
12、评价采用稳态模式评估法的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素抵抗,HOMAIR=空腹胰岛素 (mU/L)?空腹血糖(mmol/L)/22.5.1.3统计分析所有计量资料以(S)表示,计数资料以率表示.采用 SPSS11.0 统计软件进行数据分析,计量资料经正态性分布检验后,将不符合正态性分布的数据进行对数转换,转换后的资料符合正态性分布,进行分析.组间的比较用方差分析,其中两两比较用 q 检验(StudentNewmanKauls),率之间的比较用检验.以 P0.05 为差异显着 .2 结果在 PCR 产物中,由于存在 490bp 的插入型产物和 190bp 的缺失性型产物,因而在电泳后
13、,每份DNA 标本可产生三种形态之一,在纯合子可呈现一个 490bp(II 型)或 190bp(DD 型)的区带,在杂合子则呈现 490bp 和 190bp 两个带(ID 型).本试验结果显示:DD 型 42 例(14%),ID 型 135 例(45%),型 123 例(31%)(图 1)490bp190bp对照 IIIDIDDDmarker图 1ACEI/D 基因分型Fig.1Electropherogramof3genotypesofACEI/D三种基因型的 EH 患者之间的年龄,性别,体重第 1 期皮林等:高血压病患者 ACEI/D 基因多态性与胰岛素抵抗的关系指数相匹配.经检验 HOM
14、A-IR 和 FIN 不符合正态性分布,经对数转换后符合正态性分布,进行统计分析发现:DD 型的 HOMA-IR(4.653.77)和 ID型的 HOMA-IR(4.243.56)显着高于型(2.141.12),P 值分别为 0.001 和 0.023,DD 型 FIN 为(16.2110.38)mU/L,显着高于型(13.00 9.78)mU/L,P 值为 0.034.以 HOMA-IR(男性4.31,女性4.51)作为胰岛素抵抗的切割点,将大于等于该位点的个体判断为胰岛素抵抗 J,分为 EH 胰岛素抵抗组与 EH无胰岛素抵抗组,分析其 ACEI/D 基因频率及等位基因频率分布,结果显示:两
15、组 DD 型与型基因频率有显着差异(2=2.13,P=0.043),EH 胰岛素抵抗组 DD 型频率显着高于 EH 无胰岛素抵抗组.EH 胰岛素抵抗组 D 等位基因频率显着高于 EH 无胰岛素抵抗组(=2.36,P=0.038,表 1)表 1Eli 胰岛素抵抗组与 EH 无胰岛素抵抗组的 ACEI/D 基因频率及等位基因频率分布比较Tab.1C 珊 npaI 噎 s 蚰 oftllefrequencyofACEI/Dgenet)rpemidD/IallelebetweenEII.itlImgroupaIIdEliwithoutIRgroup3 讨论国内外临床及流行病学研究显示,伴胰岛素抵抗的高
16、血压个体占整个高血压人群的 32%58%,而在高血压人群中不同 AlI/D 基因型的胰岛素抵抗情况研究不多,而且结论也不一.Perticone等 2 比较了未经治疗的 EH 患者不同 ACEI/D 基因型的 HOMA-IR,FIN,FBG,发现三组存在显着差异,DDID.而在正常对照组则无此差异.有研究比较了 EH 患者和正常对照组不同 ACEI/D基因型的胰岛素抵抗情况和糖耐量,发现两组不同基因型之间均存在显着差异,但经调整年龄,BMI和血压后则无显着差异.Dengel 等 J 比较了老年EH 患者不同 ACEI/D 基因型有氧运动后胰岛素敏感指数的变化情况,发现 ACEII 型 EH 患者
17、有氧运动后胰岛素敏感指数升高显着强于 ACEID,ACEDD 型患者.本研究结果表明 ACEDD 型 EH 患者的胰岛素抵抗情况甚于其他两型,提示ACEDD 基因型可能与 EH 患者的胰岛素抵抗有关,分析原因可能由于等位基因 D 在 ACE 基因表达调控方面起活化作用,而 I 则起抑制作用,ACE 基因型不同而致个体间循环中 ACE 水平的差异将对 A形成产生作用,ACEDD 型 EH 患者的血循环和器官组织内 A含量更高.A有糖异生和糖原分解作用,血糖升高可刺激胰岛素分泌,而且 A收缩小动脉,减少了骨骼肌的血流灌注,血糖对骨骼肌供应相对减少,血糖利用率下降,可能参与胰岛素抵抗的产生.而胰岛素
18、抵抗又通过反射性交感神经兴奋性增强使血流量减少,又形成恶性循环.这种恶性循环也是高血压发生发展的重要机制之一,而高血压的发病机制已被列入与胰岛素抵抗密切相关的代谢综合整的组分之一.还有研究表明 EH 不同 ACEI/D基因型的内皮功能的障碍情况也有差别,这可能也是影响胰岛素抵抗的原因之一.【参考文献】1贾伟平,项坤三 ,陈蕾,等.上海地区 40 岁以上自然人群中胰岛素抵抗现状及特征分析J.上海医学,2001,24:199202.2PertieoneF,CeravoloR,IacopinoS,eta1.Relationshipbetweenangiotensin-convertingenzyme
19、genepolymorphismandinsulinresistanceinnever-treatedhypertensivepatientsJ.JainEndocrinolMetab,2001,86(1):172178.3DengelDR,BrownMD,FerrellRE,eta1.Exercise-inducedchaIininsulinactionareassociatedwithACEgenepolymorphismsinolderadultsJ.Ph0lGenomics,2002,11(2):7380.4PenesovaA,CizmarovaE,KvetnanskyR,eta1.Insertion/DeletionPolymorphismonACEGeneisAssociatedwithEndothelialDysfunctioninYoungPatientswithHypertensionJ.HormMetabRes,2006,38(9):592597.?61?
