1、XXX 市动物疫病预防控制中心实验室生物安全手册RDFD001版 号：第一版修订状态：第0次修订编制人员： 审 批 人： 受控状态：受控 受控编号： 持 有 人：1序 言实验室不可避免接触到病原生物、危险化学品和放射性物质。加强对从事高致病性病原生物、病原微生物实验室操作的实验室安全管理是必不可少的。病原微生物实验室的生物安全，事关重大动物疫病防控，事关实验室工作人员和社会公众的健康。本手册从鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心（以下简称市疫控中心）所进行的实验操作和所拥有的仪器设备的实际为基础，根据相关法律法规为依据，通过科学管理，从而达到全面降低实验室生物危害风险目的。对进一步完善实验室生物安全
2、管理组织，明确分工，落实责任，并进一步完善实验室内部生物安全控制体系，逐步建立起有方案目标控制评价反馈改进的闭合形生物安全管理体系，形成持续改进机制，不断提高实验室生物安全管理水平有非常重要的意义。目前，我市兽医实验室存在的主要问题是：实验室管理水平低，工作人员素质参差不齐，相应的软硬件落后，实验室的实验活动不规范。因此，加强和规范我市兽医实验室管理既是当前迫在眉睫的工作任务，同时也是全面提高我市动物疫病防控能力的重要措施。加强实验室生物安全建设和管理，不仅是对公众、环境和国家的安全负责，也是对实验室工作人员生命安全的保护。要想有一个安全和健康的实验室环境所有的实验室人员必须经过良好的培训并具
3、备熟练的安全操作技术，同时也要具有对自身安全、同事安全、社会以及环境安全的责任心。本册以近期国务院颁布的病原微生物实验室生物安全管理条例和国家标准 GB l94892008实验室生物安全通用要求为基准，参阅了国内外大量的权威文献。其内容包括“实验室生物安全管理体系” 、 “实验室生物安全基本原则” 、“生物安全实验室” 、 “实验室生物安全操作技术规范” 、 “实验室危害” 、 “实验室生物安全培训程序” 、 “安全清单”和“实验室质量管理体系概述”等八个部分；全面地介绍了实验室生物安全的相关知识，对实验室的管理和建设有一定的参考价值。其中重点讲述了“生物安全实验室”和“实验室生物安全操作技术
4、规范”两个部分。由于时间比较仓促，加上本人水平有限，其中难免会有错误和漏洞，希望读者给予批评和指正。特别感谢所有对本册做出贡献的人们！主编：二一一年六月居安思危除隐患 预防为主保安全2目 录序 言 1总 则 .- 1 -第 一 章 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 - 3 -一 、目 的 .- 3 -二 、适 用 范 围 - 3 -三 、 紧 急 事 件 电 话 和 办 公 室 联 系 方 式 .- 3 -四 、组 织 机 构 - 4 -五 、市 疫 控 中 心 的 生 物 安 全 管 理 体 系 结 构 框 - 8 -第 二 章 生 物 安 全 评 估 和 管 理 - 9 -一 、
5、风 险 评 估 和 风 险 管 理 表 .- 9 -二 、暴 露 途 径 - 9 -三 、生 物 安 全 等 级 .- 12 -四 、生 物 安 全 评 估 .- 13 -五 、生 物 安 全 检 查 制 度 .- 15 -第 三 章 实 验 室 管 理 制 度 - 17 -一 、实 验 室 准 入 制 度 .- 17 -二 、实 验 室 日 常 管 理 制 度 - 17 -三 、实 验 室 安 全 管 理 制 度 - 18 -四 、实 验 室 人 员 培 训 、考 核 制 度 .- 19 -五 、实 验 室 人 员 健 康 医 疗 监 护 制 度 .- 20 -六 、病 原 学 实 验 室
6、管 理 制 度 - 21 -七 、原 始 记 录 填 写 制 度 .- 22 -八 、档 案 管 理 制 度 .- 23 -九 、仪 器 管 理 制 度 .- 24 -十 、有 毒 药 品 、菌 （毒 ）种 保 存 管 理 制 度 - 24 -十 一 、个 人 防 护 用 品 有 关 规 定 - 25 -十 二 、实 验 室 洗 涤 、消 毒 制 度 .- 26 -十 三 、 废 弃 物 处 理 制 度 - 27 -十 四 、实 验 室 生 物 安 全 工 作 监 督 制 度 .- 28 -十 五 、病 原 微 生 物 菌 （毒 ）种 、样 本 的 接 收 、保 藏 、使 用 和 销 毁 管
7、理 规 定 .- 29 -第 四 章 实 验 室 生 物 安 全 操 作 规 范 .- 32 -一 、 一 级 生 物 安 全 实 验 室 操 作 规 范 - 32 -二 、 二 级 生 物 安 全 实 验 室 操 作 规 范 - 32 -3第 五 章 实 验 室 标 准 操 作 规 程 .- 35 -第 一 节 、生 物 安 全 实 验 室 防 护 屏 障 .- 35 -一、警示标识 .- 35 -三、设施和设备 .- 36 -四、个人防护装备的总体要求 .- 37 -五、BSL-2 实验室人员进出 实验室要求 - 38 -第 二 节 样 品 检 测 规 程 - 40 -一、实验室检测样品采
8、集规程 .- 40 -二、实验室检测样品包装和运送规程 .- 42 -三、实验室检测样品接收规程 .- 43 -四、样品检测操作规程 .- 44 -第 三 节 仪 器 设 备 操 作 规 程 - 44 -一、移液管和移液辅助器的使用 - 44 -二、高压灭菌器的使用 - 45 -三、接种环的使用 - 45 -四、生物安全柜的使用 - 45 -五、超净台使用说明 - 46 -六、离心机的使用 - 47 -七、恒温箱的使用 - 47 -八、显微镜的使用 - 48 -九、普通冰箱( 冰柜)使用、清洁与消毒 .- 48 -十、匀浆器、 摇床、 搅拌器和超声处理器的使用 .- 49 -十一、电热干燥箱的
9、使用 - 49 -十二、注射器及玻璃器皿的使用 - 50 -十三、超高速冷冻离心机操作程序与注意事项 - 50 -十四、PCR 基因扩增仪的使用 - 51 -十五、电泳仪的使用 - 52 -十六、凝胶成像仪使用注意事项 - 53 -第 六 章 消 毒 和 灭 菌 - 54 -一 、定 义 - 54 -二 、实 验 室 材 料 的 清 洁 .- 55 -三 、化 学 杀 菌 剂 .- 55 -四 、清 除 局 部 环 境 的 污 染 - 59 -五 、清 除 生 物 安 全 柜 的 污 染 - 59 -六 、洗 手 清 除 手 部 污 染 - 60 -七 、热 力 消 毒 和 灭 菌 .- 60
10、 -八 、高 压 灭 菌 - 60 -居安思危除隐患 预防为主保安全4九 、高 压 灭 菌 器 的 装 载 .- 60 -十 、焚 烧 - 61 -十 一 、废 弃 物 处 理 .- 61 -十 二 、常 用 消 毒 标 准 操 作 规 程 - 61 -第 七 章 危 害 性 物 质 管 理 规 则 .- 67 -一 、危 害 性 物 质 的 储 存 .- 67 -二 、危 害 性 物 质 的 毒 性 作 用 - 67 -三 、爆 炸 性 危 害 性 物 质 .- 67 -四 、危 害 性 物 质 溢 出 .- 68 -五 、火 的 危 害 - 68 -六 、电 的 危 害 - 70 -七 、
11、噪 声 - 71 -八 、电 离 辐 射 - 71 -九 、电 离 辐 射 保 护 原 则 .- 71 -第 八 章 实 验 室 感 染 应 急 处 置 预 案 .- 73 -一 、目 的 - 73 -二 、适 用 范 围 - 73 -三 、职 责 - 73 -四 、实 验 室 感 染 事 件 分 级 、判 定 和 解 除 - 73 -五 、紧 急 事 件 的 处 理 办 法 - 75 -六 、实 验 室 感 染 的 现 场 调 查 控 制 .- 77 -七 、实 验 室 感 染 监 测 与 报 告 - 79 -八 、实 验 室 感 染 的 预 防 .- 81 -九 、 督 察 和 责 任 追
12、 究 .- 82 -第 九 章 安 全 排 查 清 单 .- 85 -一 、实 验 室 建 筑 .- 85 -二 、储 存 设 施 - 85 -三 、环 境 卫 生 和 工 作 人 员 设 施 - 86 -四 、暖 气 和 通 风 .- 86 -五 、照 明 - 86 -六 、保 养 - 87 -七 、实 验 室 生 物 安 全 保 障 - 87 -八 、防 火 与 消 防 .- 87 -九 、易 燃 液 体 的 储 存 .- 88 -十 、电 的 危 害 - 89 -十 一 、个 体 防 护 .- 89 -5十 二 、工 作 人 员 的 健 康 与 安 全 - 89 -十 三 、实 验 室
13、仪 器 设 备 .- 90 -十 四 、感 染 性 物 质 .- 90 -附 表 93附表一、生物安全会议记录 .93附表二、实验人员生物安全定期培训记录 .94附表三、生物安全检查记录表 .95附表四、实验室生物安全事故处理记录表 .96附表五、实验室废弃物处理记录表 .97附表六、生物危害评估记录表 .98附表七、违反生物安全工作登记表 .99附表八、纠正和预防措施报告 .100附表九、实验室内务监督检查表 .101附表十、实验室室消毒记录表 .102附表十一、消防系统的维护、检验记录表 103附表十二、冰箱/冰柜温度记录表 .104附 录 ：107XXX 市动物疫病预防控制中心XXX A
14、nimal Disease Control Center- 1 -总则一、目的 为确保本实验室全体员工熟悉生物安全法律、法规，建立生物安全意识，保证相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术，避免实验室感染，防止实验室事故，特制定此手册。二、依据 病原微生物实验室生物安全管理条例 、 医疗废物管理条例 、 实验室生物安全通用要求 、WHO实验室生物安全手册 、 生物安全实验室建筑技术规范 、动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法 、 兽医实验室生物安全管理规范 、病原微生物实验室生物安全管理条例 。三、生物因子生物危害评估为保证本实验室工作人员在工作中不被危害性生物及物品所侵害，保证危害性
15、物品不外泄，对微生物实验室工作环境进行评估，以鉴定生物安全防护等级，保证生物安全。根据实验室生物安全通用要求 （GB 19489-2008） ，因我实验室只进行动物疫情监测和二、三类病原微生物限度检查及控制菌（大肠埃希菌）的检查，评估仅有一般危险性，能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。评估我实验室为生物安全防护水平为二级四、适用范围 适用于本兽医实验室所有工作人员。五、相关文件5.1 国务院病原微生物实验室生物安全管理条例5.2 国务院医疗废物管理条例居安思危除隐患 预防为主保安
16、全- 2 -5.3 实验室生物安全通用要求 （GB 19489-2008）5.4 生物安全试验室建筑技术规范5.5 动物病原微生物分类名录5.6 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则5.7 WHO实验室生物安全手册第三版（2004）6、修订 国家及农业部门涉及生物安全的法律法规发生修订更改时，本手册应相应作出修订。XXX 市动物疫病预防控制中心XXX Animal Disease Control Center- 3 -第一章 实验室生物安全管理体系一、目的建立兽医实验室生物安全体系，使之有效运行，明确相关部门及实验室人员职责，落实实验室生物安全管理责任制，做到权责统一。二、适用范围适用于与本
17、实验室实验活动相关的科室和人员。三、 紧急事件电话和办公室联系方式救护车/火警/警察 120/119/110办公室电话： 0477-实验室平面图、紧急出口、撤离路线：（见图 1-1） 。居安思危除隐患 预防为主保安全- 4 -图 1-1 实验室平面布局图四、组织机构生物安全管理实行中心主任责任制。中心主任组织并授权生物安全领导小组负责生物安全工作，同时委派一名中心副主任具体主管；成立生物安全领导小组；相关科室的主任应对所辖科室的生物安全工作承担相应的领导责任。科负责人或项目负责人负责科室或具体项目的运行管理；各级人员应认真阅读、理解本手册，并在相关实验活动中严格遵守，在发生生物安全隐患、意外事
18、件或事故时应及时报告。办公室、质管办等管理部门对责任范围内的生物安全工作进行监督检查；其他相关职能部门对生物安全体系的运行提供所需保障。实验室设置专职或兼职安全监督员。4.1 生物安全管理机构4.1.1 实验室生物安全管理工作领导小组及办公室人员组 长：XXX 市农牧业局副局长、市兽医局局长 电话：XXX副组长：XXX 市 动 物 疫 病 预 防 控 制 中 心 主 任 电 话 ： XXXXXX 市动物疫病预防控制中心副主任 电话：XXXXXX 市动物疫病预防控制中心副主任 电话：XXX成 员：XXX XXX4.1.2 生物安全专家委员会人员及职责主任委员：XXX 市动物疫病预防与控制中心副主
19、任 电话：XXX成 员 XXX XXX4.1.3 生物安全负责人：XXX（疫控中心主任） 电话：XXX4.1.4 实验室安全管理负责人：XXX 电话 XXX实验室生物安全管理负责人：XXX 电话：XXX4.1.5 诊断室实验室负责人：XXX 电话：XXX4.1.6 疫情监测管理负责人：XXX 电话：XXX4.1.7 实验室技术人员及实验活动辅助人员：XXXXX4.1.8 安全监督员：XXXX 电话：XXXX4.2.各部门或人员职责4.2.1 实验室生物安全管理工作领导小组XXX 市动物疫病预防控制中心XXX Animal Disease Control Center- 5 -领导小组是本实验室
20、生物安全管理工作领导决策机构，其主要职责是： 负责实验室生物安全组织管理、协调指挥及重大事项决策。 负 责 收 集 汇 总 兽 医 实 验 室 设 立 、 分 布 及 高 致 病 性 病 原 微 生 物 实 验 室 工 作 情 况 。 及时将有关情况报告领导小组。 组织进行实验室生物安全管理工作的调查和监督检查。 组织制定实验室生物安全技术方案。 组织进行全市人员培训和师资培训。4.2.2 生物安全专家委员会 专家委员会负责为市领导小组提供实验室生物安全管理的情报信息、技术、装备、资料库建设等决策的咨询意见； 负责针对现场紧急处置、救援、检疫鉴定、区域划分、洗消防护、危害评估和事后恢复等问题进
21、行研究，提出指导和评估意见； 负责对实验室生物安全相关科学研究进行指导和评估；参与实验室生物安全相关技术方案、培训教材审定和人员培训工作。4.2.3 生物安全负责人市疫控中心主任指定分管实验室中心副主任为具体生物安全负责人。生物安全负责人的主要职责是： 对生物安全负总责； 负 责 建 立 本 单 位 生 物 安 全 管 理 体 系 ， 落 实 生 物 安 全 管 理 责 任 部 门 或 责 任人 。 定 期 召 开 生 物 安 全 管 理 会 议 ， 对 实 验 室 生 物 安 全 相 关 的 重 大 事 项 作 出 决定 。 批准和发布实验室生物安全手册、生物危害评估等重要文件。 保持与生物
22、安全办公室的联系。4.2.4 实验室生物安全科责任人各专业实验室主任为实验室生物安全责任人，其主要职责是： 负责组织制（修）订和实施实验室生物安全手册、生物安全规章制度、操作规范和标准操作规程。 负责组织对涉及的生物因子、使用动物、重组 DNA 以及基因修饰物质居安思危除隐患 预防为主保安全- 6 -的研究方案进行审查和风险评估。 负责对本实验室生物安全防护，微生物菌（毒）种和生物样本保存和使用，实验室安全操作，实验室废气、废水、废弃物处置和消毒灭菌等规章制度实施情况进行监督、检查，并定期评估实施效果。 负责组织跟踪国际国内实验室生物安全管理最新动态。提供实验室操作的咨询以确保遵循国家相关的标
23、准。 负责定期调查、了解实验室工作人员的健康状况和健康监护情况。决定必要的特殊医学监测。 组织生物安全知识培训并评估培训效果。 指导基层疫控中心开展相关实验室生物安全工作。4.2.5 诊断实验室负责人 负责实验室的日常管理、实验技术和生物安全工作； 组织生物安全防护知识和有关法规、制度、规程的宣贯； 组织相关人员按要求进行培训、考核、体检和预防接种； 决定进入实验室的工作人员； 加强人员的生物安全防护，牢固树立安全意识，建立实验室生物安全制度，保证相关上岗人员在场安全防护技能上得到培训。持生物安全证上岗。 监督有关法规和操作规程的执行，纠正出现的违规活动并有权停止实验； 定期组织对实验室设备各
24、项技术参数的检查和实验室装备的维护保养； 负责实验室紧急情况及事故的处理并向生物安全领导小组报告；4.2.6 疫情监测管理科负责人 负责实验室生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作。 就 技 术 方 法 、 程 序 和 方 案 、 生 物 因 子 、 材 料 和 设 备 进 行 定 期 的 内 部 安 全检 查 。 纠正违反生物安全操作规程的行为。 在出现潜在感染性物质溢出或其他事故时，协助事故调查。 检查和监督实验室废弃物的有效管理与安全处置。 检查和监督实验室各项消毒灭菌措施的落实情况。XXX 市动物疫病预防控制中心XXX Animal Disease Control Center- 7
25、-4.2.7 实验室技术人员及实验活动辅助人员 实验室技术人员必须严格遵守实验室生物安全管理制度，按规定接受培训、考核、体检和预防接种； 现场标本的采集、运送过程中，做好人员的防护和标本的密闭包装，并及时送达相关实验室检测； 病原检测工作在相应生物安全等级的实验室进行，保持良好的内务行为，并及时做好废弃物处置和记录； 严格按规范做好菌种标本分类保存和记录工作，执行双人双锁和专室存放制度。经批准向上级机构上送菌株应符合相应的安全规定，并遵守国家关于道路、铁路和水路运输危险材料的有关要求； 按要求执行标准操作规程和仪器设备操作规程，做好实验记录； 按规程进行常规消毒和意外事件紧急处理； 发现生物安
26、全隐患或发生事故及时向有关上级报告； 参与相关工作的危害评估及生物安全事故认定与处置。4.2.8 安全监督员有权力监督实验室制度、操作规程的实施，发现不符合规定的行为或安全隐患有权要求有关人员进行纠正；对于发现的严重问题及时向实验室主任报告或直接向生物安全领导小组报告；做好监督记录。居安思危除隐患 预防为主保安全- 8 -五、市疫控中心的生物安全管理体系结构框图 1-2 生物安全管理体系结构框图安全监督员疫情监测管理科 诊断试验室实验室相关职能科室 相关业务科室 后勤保障部门生物安全管理科办公室中心主任中心副主任（生物安全负责人）XXX 市动物疫病预防控制中心XXX Animal Diseas
27、e Control Center- 9 -第二章 生物安全评估和管理在建设实验室或开展实验活动之前，生物安全办公室应参照卫生部名录组织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、应急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。实验室生物危害评估结果应由中心的法定代表人签字认可，并归档保存。生 物 安 全 负 责 人 最 终 对 实 验 室 内 的 安 全 负 责 ， 其 职 责 之 一 是 指 导 现 行 工 作 以 判断 潜 在 的 危 害 （ 生 物 安 全 评 估 ）， 职 责 之 二 是 实 验
28、 开 始 前 采 用 合 适 的 安 全 程 序 （ 风 险管 理 ） 。特定的实验开始前需要预先进行登记和通过生物安全负责人的批准。风险评估和风险管理的 5 个“P”是指： Pathogen 病原体 危险的生物因子 Procedures 规程 推荐的实验操作和安全的操作规范 Personnel 人员 相应的培训与技能 Protective equipment 防护设备 防护衣和安全设备 Place 地点 实验室所在位置实 验 室 工 作 的 每 一 方 面 都 应 考 虑 风 险 评 估 和 风 险 管 理 的 5 个 “P”。 正 确 地 指 导 和风 险 评 估 能 帮 助 免 受 生
29、物 危 害 的 暴 露 ， 以 及 最 大 程 度 减 少 实 验 室 受 到 感 染 的 可 能 性 。一、风险评估和风险管理表 （见表 2-1）二 、暴露途径生物因子要导致疾病发生，首先必须有足够数量的因子进入或侵入人体，进入的途径有经口、呼吸道、黏膜及与动物的接触（叮、抓伤） ，当生物危害物进入人体，它产生疾病还需满足其它条件，它们必须在人体细胞、组织和/或器官内生长繁殖，克服人体的自然免疫机制和变异或适合人体的变化。年 龄 、 免 疫 状 况 、 职 业 、 物 理 或 地 理 环 境 等 因 素 会 导 致 个 体 对 疾 病 的 不 同 易 感性 。在涉及生物危害时，确定其最低感染
30、量是很困难的。同一病原体相同剂量在居安思危除隐患 预防为主保安全- 10 -一个人身上可能无症状，而在另一人身上可能导致严重的症状甚至致命。有些微生物只要一个进入到人体就足以侵入并促使疾病的发生，结核杆菌就是一个例子。暴露途径的更多信息（见表 2-2） 。表 2-1 风险评估和风险管理表风险评估 风险管理病原体 传染因子类型 (见表 2-4) 感染途径 感染性疾病发生过程病毒性、致病性、数量、浓度、人群中影响程度、昆虫媒介的存在 登记 生物安全办公室 感染机构 约束机构 疫控中心 选择机构规程 气溶胶风险：超声、离心 、混匀、混合、振动 经皮风险: 针头、注射器、玻璃吸液管、解剖刀、低温刀片/
31、刀等 飞溅/溅泼风险: 吸液管、接种环 建 立 一 套 结 合 安 全 使 用 的 标 准 操 作 规 程 遵守基本的生物安全规则 实验室、工作区域、 BSL-2 或更高传染因子实验室内的设备贴上标识 指导实验室操作和检查实验设备 用非传染性材料做尝试性试验，以测试新的规程/设备人员 人员免疫 赘生物疾病 感染 免疫抑制治疗 年龄、种族、性别、妊娠 手术 (脾、胃切除) 免疫力 后暴露预防 血清库 对安全的态度 安慰 外伤、破损皮肤、湿疹、皮炎 安全培训 以前从事生物危害的经历 技术的熟练程度 立即向生物安全负责人和生物安全办公室报告所有的暴露事件、被忽视的事件以及相关疾病的症状 调查/核实事
32、件/飞溅等，以防止再次发生防护设备 防护： 气溶胶-可以吸入粒子直径5m 飞溅/溅泼 锐器 个人防护设备 (PPE): 口罩 HEPA, N-99, N-95,等 面部（眼、鼻、嘴）防护-面具和安全眼镜、或盖住下颌的面罩、前面无缝外衣或实验室外衣 手套 生物安全柜 安全离心管/转子XXX 市动物疫病预防控制中心XXX Animal Disease Control Center- 11 -地点 风险组/生物安全等级、设备 气溶胶风险 受限制的过道 基本的实验室-门、易清洁的地方、冲眼器、窗户 标签 用直接气流预防居安思危除隐患 预防为主保安全- 12 -表 2-2 实验室内传染因子的传播途径暴露
33、途径 防护措施黏膜：通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的黏膜通过以下方式进行面部的预防： 戴护眼镜或面罩 在生物安全柜内或保护罩后工作 进行规范的微生物操作吸入：由于离心渗漏、溢出或产生气溶胶的操作如吸液、混匀等而吸入了可吸入的气溶胶粒子 (直径5m)。通过以下方式避免暴露气溶胶： 在生物安全柜内工作 离心时使用密封转子或杯 进行规范的微生物操作吞咽：口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟通过以下方式防止经吞咽产生的暴露： 不在实验室内吃、喝或吸烟 始终使用手工吸液 进行规范的微生物操作经皮:被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹通过以下方式防止皮肤破损： 用塑料制品代替玻璃制品 使用锐
34、器要非常小心 用后立即将锐器丢弃在坚固防漏容器内 适当限制动物 戴不易划破的手套、袖套、 用防水绷带包扎好破损皮肤并戴双层手套接触 (间接传播):通过接触污染面（如凳、电话、电脑、设备把手等）的手来触摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不彻底。通过以下方式防止间接暴露： 工作台面消毒 工作后、脱去手套后总是洗手。 不要用戴手套或不戴手套的手触摸脸部（良 好的个人习惯） 实验室内不使用化妆品。在实验室内的任何时候始终执行以下工作制度： 不在实验室内吃、喝或吸烟 工作结束后或脱去手套后总是洗手 实验室内穿戴好个人防护设备，离开实验室前务必脱去个人防护设备 不用口吸、始终用手工吸液 使用锐器格外小心 用合
35、适的设备抑制气溶胶的产生XXX 市动物疫病预防控制中心XXX Animal Disease Control Center- 13 - 对工作台面、溢出物和废弃物进行消毒三、生物安全等级国家和卫生部、农业部门对微生物和生物医学实验室确立了从事生物危害工作对应的生物安全等级。提供了微生物操作、实验室设备和安全设施的结合使用，以及所选的感染因子与使用推荐的四种生物安全等级的实验室操作。以下是 1-4 级生物安全所要求的实验室操作、防护设备、实验室设施和传染因子的概括（见表 2-3） 。表 2-3 推荐的生物安全等级与相应感染因子生 物 安全 等 级 感 染 因 子 规 程安 全 设 备（ 第 一 道
36、 屏 障 ）实 验 室 设 备（ 第 二 道 屏 障 ）BSL-1已 知 对 健 康 成 人 和 动 物 不 造 成 疾病 。标 准 微 生 物 操作 。不 需 要 。 开 放 工 作 台 。防 止 节 肢 动 物 和 啮 齿动 物 进 入 。实 验 室 靠 近 出 口 处 有洗 手 池 。实 验 室 的 窗 户 有 纱 窗 。适 当 的 消 毒 设 备 。BSL-2能 引 起 人 或 动 物 发 病 ，但 一 般 情 况 下 对 健 康工 作 者 、 群 体 、 家 畜或 环 境 不 会 引 起 严 重危 害 的 病 原 体 。 实 验室 感 染 不 导 致 严 重 疾病 ， 具 备 有 效
37、 治 疗 和预 防 措 施 ， 并 且 传 播风 险 有 限 。BSL-1操 作 加 ：限 制 进 入生 物 危 害警 示 标 记锐 器 谨 慎使 用制 定 安 全手 册 ， 确 定所 有 废 物消 毒 和 医 疗监 督 计 划I 级 or II 级 生 物 安全 柜 或 其 它 物 理 防 护设 备 ， 这 些 设 备 应 用于 可 能 会 产 生 飞 溅 或气 溶 胶 的 感 染 因 子 的操 作 ； 个 人 防 护 设 备 ：外 套 、 手 套 、 所 需 要的 面 部 防 护BSL-1 加 ： 实 验 室 门 应 带 锁 并可 自 动 关 闭 。供 应 、 排 放 真 空 系 统BMB
38、L 上 的 应 设 洗 眼 设施 、 高 压 灭 菌 锅 。BSL-3能 引 起 人 或 动 物 严 重疾 病 ， 或 造 成 严 重 经济 损 失 ， 但 通 常 不 能因 偶 然 接 触 而 在 个 体间 传 播 ， 或 能 用 抗 生素 抗 寄 生 虫 药 治 疗 的病 原 体 。BSL-2 操 作加 ： 控 制 进 入 所 有 废 弃物 消 毒 实 验 室 衣服 洗 之 前 对其 进 行 消 毒II 级 （ B2） 或 级 生物 安 全 柜 和 用 于 所 有感 染 因 子 操 作 的 其 它物 理 防 护 设 备 ； 个 人防 护 设 备 ： 防 护 衣 、手 套 、 需 要 的 呼
39、 吸 道防 护 。 清 洁 区 设 置 淋浴 装 置 。BSL-2 加 ：自 成 隔 离 区 ， 进 入 实 验室 的 过 道 用 物 理 方 式 隔 开 。入 口 处 采 用 自 动 关 闭双 层 门 。独 立 的 送 排 风 系 统 ， 空气 排 至 室 外 ， 不 在 室 内 循环 。实 验 室 负 压实 验 室 污 染 区 内 设 不 排蒸 汽 的 高 压 蒸 汽 灭 菌 器 。居安思危除隐患 预防为主保安全- 14 -BSL-4能 引 起 人 或 动 物 非 常严 重 的 疾 病 ， 一 般 不能 治 愈 ， 容 易 直 接 、间 接 或 因 偶 然 接 触 在人 与 人 ， 或 动
40、 物 与 人 ，或 人 与 动 物 ， 或 动 物与 动 物 之 间 传 播 的病 原 体 。BSL-3操 作 加 ：进 入 实 验室 前 更 衣 出 口 处 冲 淋所 有 材 料在 出 口 处 消毒按 照 级 生 物 安 全 的所 有 步 骤 进 行 ， 全 身穿 上 有 空 气 供 应 系 统 、正 压 个 人 防 护 衣 。BSL-3 加 ：远 离 建 筑 物 或 单 独 的区 域安 装其 它 需 求根据国家标准 GB 19489-2008实验室生物安全通用要求编制。四、生物安全评估4.1 生物因子危害评估目前实验室内主要开展的病原体检测的范围及检测方法为（见表 2-4）：表 2-4 本
41、实验室主要开展的检测项目疫 病 种 类 项 目 /参 数 检 测 标 准 （ 方 法 ） 名 称 及 编 号 （ 含 年 号 ）口蹄疫抗 体 检 测 ， 液 相 阻 断 ELLSA 试 验正 向 间 接 凝 集 试 验 ； 病 原 学 检 测 ：非 结 构 蛋 白 ELLSA 试 验口蹄疫诊断技术（GB/T18935-2003）高致病性禽流感抗 体 检 测 ， 红 细 胞 凝 集 抑 制 试 验病 原 学 检 测 ： 金 标 法红细胞凝集抑制试验（GB/T17999.1-1999）鸡新城疫 抗 体 检 测 ， 红 细 胞 凝 集 抑 制 试 验病 原 学 检 测 ： 金 标 法 新城疫检疫技术
42、规范 （GB16550-1996）猪繁殖和呼吸综合症抗 体 检 测 ， ELLSA 试 验 猪繁殖和呼吸综合症诊断方法（GB/T18090-2000）猪瘟 抗 体 检 测 ： 正 向 间 接 凝 集 试 验病 原 学 检 测 ： ELLSA 试 验 猪瘟诊断技术（GB16551-2008）猪丹毒 血 清 培 养 凝 集 试 验 猪 丹 毒 诊 断 技 术 (NY/T 566-2002)猪链球菌病 定型 PCR 反应 猪链球菌 2 型 PCR 定型检测技术（GB/T 19915.3-2005）鸡白痢 细 菌 分 离 与 鉴 定 鸡白痢沙门氏菌检验 （GB/T17999.7-1999）鸡 马 立
43、克 氏 病 疫 病 监 测 ， 琼 脂 扩 散 试 验 鸡马立克氏病诊断技术 （GB/T18643-2002）禽曲霍菌病 病 理 学 检 查 ， 病 原 学 检 查 禽曲霍菌病诊断技术 （NY/T559-2002）禽霍乱 临 床 诊 断 ， 病 理 剖 检 ，病 原 分 离 鉴 定 禽霍乱（禽巴氏杆菌病）诊断技术 （NY/T563-2002）猪旋毛虫病 病 原 分 离 与 鉴 定 ， 压 片 镜 检 猪旋毛虫诊断技术 （GB/T18642-2002）XXX 市动物疫病预防控制中心XXX Animal Disease Control Center- 15 -猪囊尾蚴病 病 原 分 离 与 鉴 定
44、 ， ELLSA 试 验 猪囊尾蚴病诊断技术 （GB/T18644-2002）棘球蚴病 病 原 分 离 与 鉴 定 ， IHA, ELLSA 试验 动物棘球蚴病诊断技术 (NY/T1466-2007)猪水泡病 反 向 间 接 血 凝 ， 琼 脂 凝 胶 免 疫 扩散 试 验 猪水泡病诊断技术 （GB/T19200-2003）副结核病 皮 内 变 态 反 应 试 验 副结核病诊断技术 （NY/T539-2002）狂犬病 抗 体 检 测 ， ELLSA 试 验 狂犬病诊断技术（GB/T 18639-2002）猪 巴 氏 杆 菌 病 临 床 诊 断 ， 病 理 剖 检 ，病 原 分 离 鉴 定 猪巴
45、氏杆菌病诊断技术 （NY/T564-2002）猪丹毒 临 床 症 状 观 察 ， 病 原 分 离 和 鉴 定 猪丹毒诊断技术 （NY/T566-2002）结核病 细 菌 学 ， 变 态 反 应 试 验 动物结核病诊断技术 （GB/T18645-2002）布鲁氏菌病 平 板 凝 集 ， 试 管 凝 集 试 验 动物布鲁氏菌病诊断技术 （GB/T18646-2002）炭疽 细 菌 学 、 沉 淀 试 验 动物炭疽诊断技术 （NY/T561-2002）球虫病 病 原 检 查 ， 病 理 检 查 动物球虫病诊断技术 （GB/T18647-2002）马鼻疽 鼻 疽 菌 素 点 眼 试 验 马鼻疽诊断技术
46、 （NY/T557-2002）羊痘 诊 断 、 检 疫 、 临 床 检 查 绵羊痘和山羊痘诊断技术 （NY/T576-2002）蓝舌病 诊 断 、 检 疫 、 临 床 检 查 蓝 舌 病 诊 断 技 术 (GB/T 18636-2002)马 流 产 沙 门氏 菌 病诊 断 、 检 疫 、 细 菌 学 检 查 马流产沙门氏菌病诊断技术（NY/T570-2002）痒螨、疥螨 病 原 检 查 ， 病 理 检 查 羊螨病诊断技术 （NY/T1470-2007）牛羊胃肠道线虫 病 原 检 查牛羊胃肠道线虫检查技术（NY/T1465-2007）弓形虫 病 原 检 查 ， 间接血凝试验 弓形虫病诊断技术 （
47、NY/T573-2002）根据上述我中心实验室可开展病原体检测能力的表格，所开展得工作为动物疫病的血清学检测和低致病动物疫病病原学检验。我中心实验室环境设施设备操作及防护水平符合生物安全二级实验室的标准，评估我中心实验室生物安全级别为二级。本中心的实验室仅仅允许在生物安全等级为B SL-1和B SL-2的生居安思危除隐患 预防为主保安全- 16 -物因子在实验室里工作。4.2 其它危害风险评估此外，除考虑特定生物因子固有的致病危害外，风险评估还应包括： 物理、化学、电气风险 人员相关风险（身体状况、能力、影响工作的压力等） 设备、设施的风险 意外事故/事件（水灾、火灾、地震、冰冻等）带来的风险
48、 实验动物的风险 清洁剂、消毒剂的风险五、生物安全检查制度为确保实验室生物安全制度、措施落实到位，避免生物安全事故，特制订本制度。5.1 主任每年至少组织一次生物安全全面检查，对关键控制点可根据风险评估报告适当增加检查频率。检查内容包括： 生物安全管理体系、实验室活动运行情况； 生物安全管理制度是否完善、是否落实； 实验室设施、设备和人员的状态； 应急装备、消防装备、报警体系和撤离程序功能及状态是否正常； 危险物品如可燃易燃性、传染性、放射性以及有毒物质的防护、控制情况； 废物处理及处置情况； 不符合规定的工作是否及时得到纠正；h)现有资源能否满足工作要求等。5.2 科室负责人负责实验室生物安全的全面管理，检查、督促生物安全监督员工作，每季度进行科室生物安全工作检查。检查内容包括： 生物安全监督员工作记录； 菌（毒）株、样本的运输、保存、使用、销毁情况； 生物安全实验室的消毒和灭菌情况以及感染性废物的处理情况； 生物安全设备的运行、维护情况；XXX 市动物疫病预防控制中心XXX Animal Disease Control Center- 17 - 防护物资的储备情况等。5.3 生物安全监督员负责实验室日常工作的生物安全监督、检查。检查内容包括：
