1、 中山大学博士后学位论文人血清肿瘤标志物液相芯片检测试剂的研制姓名：陈玮申请学位级别：博士后专业：基础医学指导教师：何蕴韶20060101液相芯片是基于美国緓我们选择了数种临床上常用的肿瘤标志物癌胚抗原滋鞍、两步法杭觳夥段直鹞人淄幢曛疚镆合嘈綣”寺测试剂的研制、。 一步法杭觳夥段直鹞、我们的研究结果证明，液相芯片检测试剂可在血清中的、水平，该试剂操作简单、快速、灵活、灵乙肝表面抗原检测试剂人血清肿痼标志物液相芯片榆测试剂的研制 砌珽，琣， ， 琾， 畇 ，珹 ，瓹， 隺瑀甀， 瓼，琱 琩人血清肿癌标志物液相芯片椅测试剂的研制前言瓵除了具有快速、灵敏、灵活、检测范围广等显著特点，其最突出优势还在
2、于仅需少量研究工具。珻和时间分辨荧光免疫分析法 ，珀酰亚胺，购自公司。藻红三、方法虻慕涣!】即羧基化微球于微量离心管中， 罨撼逡中间漩涡振荡一次缓蠼枨蚶胄，室温避光温和振荡，然后竦垂埂稳绽胄奈颍尤甌，挛琌叠氮钠， 甌重悬微球。取少量微球悬液用水适当稀释，显微镜，再用:霞觳釩、的液相芯片试剂甀抗原标准品的制备：用标准品稀释液，挛叠氮钠，表:霞觳釩、时的抗原标准品浓度痬捕获抗体进行微球的别单独与挚乖种生物素标记抗体孵育后，检测荧光值。真空抽滤去除孔内液次，随线计算得出相应浓度值。评价指标牖饷庖叻治龇 褪奔浞直嬗饷庖叻治龇检测结果剑砸合嘈酒隒蚑的测值之间进行线性相关回归分人血清肿痈标志物被相芯片榆测
3、试剂的研制交联抗体最佳用量的确定：方法同。各抗原抗体之间交叉反应的检测：方法同。操作方法：方法同。芏龋悍椒。:霞觳釩、 的液相芯片试剂垒塑壁塑堑查竺堕塑：堡苎丝型堕型塑婴型表:霞觳釩、时的抗原标准品浓度痬各抗原抗体之问交叉反应的检测；方法同。评价指标抗原标准品的制备：所用标准品同。稀释微球混合液以及 锼乇昙强固寤旌弦各，室温避光振荡孵育 痬，室温避光振荡孵育软件进行统计学分析。对两个样本率的比较采人贾兹繁辏嘉锍嘈綡术椅测试剂的研应，然后测荧光值。与无关抗原或抗体反应时荧光值低面与特异抗原或抗体反应时荧人血清肿痛标志物液相芯片检测试剂的研制 弥档目乖分别为咖测定鲅粜匝G灞瓯荆贸隽 :霞觳釩、液相
4、芯片试剂的批内人血清肿瘤标志物液相芯片检测试剂的研制表合嘈酒约良觳釧组正常人血清标本的结果统计表平均值为甀，标准差为芯阳阴茹： 墨 ： 瞿 。瞿 。， 瞿 一，琍，锼乇昙强固娣胖犬；固褰涣N颉乖曜紃铺和生物素标记抗体表液相芯片试剂。胖天前斤的检测性能比较涣?固遄罴延昧浚簍痘窨固宓淖罴呀涣A课人血清肿瘤标志物液相芯片检测试剂的研制，即分别达到、即分别达到、个对数值。膎、人血清肿瘤标怎物淑相芯片柃测试剂的研制水平，结果见表。样比百本例分数比”眇，平均值为以下，因此检测血清的鲁慰贾捣段采用联合检测、的液相芯片试剂测定軨份茹瞿妻 翟 ， ， 四格表一方检验，交联抗体最佳用量：痘窨固宓淖罴呀涣A 课。、
5、 ，即分别达到甇、个对数值。些堕壁堡楚查塑垫塑：兰笠竺堡型塑型表联合检测珹、合嘈酒约恋呐诰芏表联合检测、合嘈酒约恋呐渚芏籓，具有很好的相关性。 四、一步法联合检测和的液相芯片试剂将和的抗体交联微球、抗原标准品与标记抗体按一步法共同孵育 吹雍笤偌尤隨反应、，即分剐达到、，即分别达到、个对数值。痬批内为，批间为得骶哂薪虾玫闹馗葱表、 士士 士的最主要方法，在非洲和东南亚国家也常被用作在乙型肝炎患者中筛查肝细胞性肝癌世界的绒毛膜癌患者死亡率明显下降。提供帮助。核素标记的抗体与肿瘤抗原结合，可通过扫描来定位肿瘤。用。患者经治疗后肿瘤标志物的升降与患者的疗效和预后有良好的相关性。由于数种肿瘤标志物联合检
6、测对肿瘤的早期诊断及疗效监测更具价值，而同时检测多项指标依靠传统检测手段无法实现，因此在实际工作中亟需一种能够同时完成多瓵子进行检测，俊肔耣矗鑣“ 弱緉加繿 仔苣啊 笞鴇，而且两种方法的检测结果相关性好，因此在检测细胞因子方面，液相芯片发的试剂盒大多用于细胞因子和觳獾然芯苛煊颍驯籉批准用于临床人血清中的、水平，该方法灵活、好，并且大大节省了时间、样本和试剂，提高了检测效率。一、液相芯片试剂检测肿瘤标志物的优点更宽，尤其适用于夹心法及多指标免疫测定时。讨过夜，以保证微球上的交联抗体最低检测限，增宽了检测范围。仅需 茉诩觳馐奔渖弦合嘈酒约两现诨猓缁 馐约数光值的中值作为结果，相当于每个样本重复检测了危鳨仅为双复孔
