1、药物分析,第 八 章,游 奎 一,湘 潭 大 学 化 工 学 院,对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析,本 章 主 要 内 容,第一节 结构与性质,第二节 鉴别试验,第三节 特殊杂质与检查,第四节 含量测定,学 习 要 求,一、掌握对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的结构和性质，代表性药物的鉴别、检查和含量测定的基本原理与方法。二、熟悉对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的杂质结构、危害、检查方法与含量限度。三、了解影响对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物稳定性的主要因素。,局麻药物,它是一类能在用药部位局部可逆性地阻断感觉神经冲动发生 与传导的药物。,局麻药物,亲脂性芳香环,中间连接功能基,亲水性胺
2、基,第一节对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的结构与性质,芳胺类药物分为两类,芳伯氨基未被取代,芳伯氨基被酰化,一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与典型药物,（一）基本结构与典型药物,对氨基苯甲酸酯母体,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物,（一）基本结构与典型药物,酰化,盐酸布比卡因,盐酸利多卡因,（一）酰苯胺类药物的基本结构与典型药物,（一）酰苯胺类药物的基本结构与典型药物,盐酸罗哌卡因,盐酸妥卡尼,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,醋氨苯砜,（一）酰苯胺类药物的基本结构与典型药物,1.芳伯氨基特性：重氮化偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易氧化
3、变色等。盐酸丁卡因无此特性。,（二）主要理化性质,水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸 丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均 为对氨基苯甲酸。,弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具有弱碱性。,4.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可与Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。,5.吸收光谱特性：对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物分子结构中 均含有苯环及相应的取代基与脂肪胺侧链，具有特征的紫外吸 收光谱和红外光谱行为。,6. 其它特性：因结构中有 芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于
4、水，难溶于有机溶剂。,第二节、鉴别试验,（一）重氮化-偶合反应分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯 氨基的药物，均可发生此反应。,Ar-NH2,HCl,NaNO2,重氮盐,OH-,-萘酚,橙黄猩红色,生成偶氮染料,直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺、 对氨基水杨酸钠 等,间接反应：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯,（一）重氮化-偶合反应,但盐酸利多卡因、盐酸布比卡因由于它们的空间位阻 效应，很难发生重氮化-偶合反应。,1.苯佐卡因和盐酸普鲁卡因 ChP（2000） 鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷
5、，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,（一）重氮化-偶合反应,（一）重氮化-偶合反应,丁卡因虽无芳伯氨基，但分子中的芳香仲胺在酸性溶液中可与NaNO2反应生成N亚硝基化合物的乳白色沉淀。,特例：,盐酸丁卡因：,1. 与铜和钴离子反应：（芳酰氨的特征）利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物，该有色物质溶入氯仿显黄色；与氯化钴生成亮绿色细小钴盐沉淀。,（二）与重金属离子反应,三、鉴 别 试 验,具体反应如下：,2. 羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。,（二）与重金属离子反应,芳酰胺,羟肟酸,3. 与汞离子反应,盐酸利多
6、卡因 + H2NO3 + Hg(NO3)2,黄色,对氨基苯甲酸酯 H2NO3 + Hg(NO3)2,红色或橙黄色,（二）与重金属离子反应,1. 盐酸普鲁卡因的鉴别,(三) 水解产物反应,（白色沉淀）,具体的化学反应：,2. 苯佐卡因的鉴别,苯佐卡因 + NaOH,乙醇,乙醇 + I2 + NaOH,CHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）,(三) 水解产物反应,(四) 制备衍生物测熔点,1. 三硝基苯酚衍生物的制备：盐酸利多卡因和盐酸布比卡因,黄色沉淀,黄色沉淀,2. 硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因,(五) 制备衍生物测熔点,白色结晶,强酸制弱酸,(五) 紫外特征吸收光谱法,1. 在max 处测定供试
7、液的吸光度。例如：盐酸布比卡因在0.01mol/L%盐酸中于max =263nm和max =271nm测定最大吸收，其吸光度分别为0.530.58与0.430.48,2. 在规定的浓度测定max 例如：醋氨苯砜5g/ml; 在max =256nm; 284nm 处有最大吸收。,(七)红外吸收光谱法,盐酸普鲁卡因 ChP（2010）盐酸普鲁卡因胺 鉴别 （3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱一致。见书P244,(一)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,为什么要检查？,怎样检查？,采用HPLC进行检查。,杂质来源： 水解产生、脱羧、氧化,三、特殊杂质检查,流动相：磷酸二氢钾-甲醇=68:32
8、检测波长：279nm,三、特殊杂质检查,(二)盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺的检查,采用HPLC进行检查。,(三)盐酸罗哌卡因光学纯度的检查,盐酸罗哌卡因有两种对映体，一个是R构型，一个是S构型。其中R-盐酸罗哌卡因对心脏毒性大，要限制其含量，其限量 是0.5%。,四、含量测定,Ch.P2010中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。,Ar-NH2; Ar-NHCOR; Ar-NO2均可采用此法。 即：具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素
9、）经还原，也可用本法测定。,（一）亚硝酸钠滴定法,还原,1. 原理：,四、含量测定,（一）亚硝酸钠滴定法,测定主要条件：,(1) 加KBr增加反应速度,重氮化的反应历程为：,（一）亚硝酸钠滴定法,四、含量测定,重氮化的反应历程为：,控速步骤, KHBr 比KHCl大300倍,生成NOBr量大得多加快反应速度,重氮化的反应历程为：,(2) 加过量HCl加速反应：重氮化速度加快；重氮盐在酸性介质中稳定；防止生成氨基偶氮化合物。Ar-N2+Cl- + H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar + HCl一般摩尔比为Ar-NH2 : HCl = 1 : 2.56 。,（一）亚硝酸钠滴定法,四、含量测定,
10、(3) 室温条件下滴定:温度高反应速度快；每升高10加快2.5倍,但太高,可使Ar-N2+Cl- + H2O,Ar-OH + N2 + HCl,(4) 滴定管尖端插入液面下滴定,（一）亚硝酸钠滴定法,四、含量测定,3. 指示终点的方法(实验装置见书P250)(1) 永停滴定法 溶液 检流计 终点前： 无过量 无电流HNO2 终点时：有过量 有电流（使指针偏离零HNO2 永停在某一位置）(2) 外指示剂法用KI-淀粉指示剂指示终点的原理：2NaO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2O,VV,（3）内指示剂法 中性红 不可逆指示剂,（3）内指示剂
11、法 中性红 不可逆指示剂 (4) 电位法,四、含量测定,(二）非水溶液滴定法,基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因侧链叔胺氮具有弱碱性，因此采用非水溶液滴定法测含量。在滴定盐酸布比卡因时，因其在冰醋酸中碱性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比醋酐合质子的酸性强，可增加碱性。,2BHCl + Hg(Ac)2,2BHAc + HgCl2,BHAc + HClO4,BHClO4 + HAc,盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程如下：,四、含量测定,1. 对盐酸丁卡因的含量测定根据朗伯比尔定律计算其含量。,（三）紫外分光光度法,四、含量测定,此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液
12、中常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两者的含量，该法简单准确。色谱条件：色谱柱为BondapakC18 300mm4mm 流动相为甲醇1HAc(40:60); UV检测器250nm.,（四）HPLC法,四、含量测定,98：133盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（ ） A. 重氮化偶合反应 B. 羟肟酸铁盐反应 C. 氧化反应 D. 磺化反应 E. 碘化反应,相关练习题,97：137采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（ ） A. 苯巴比妥 B. 盐酸丁卡因 C. 苯佐卡因 D. 醋氨苯砜 E. 盐酸去氧肾上腺素,相关练习题,95：85下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（ ） A
13、. 乙酰水杨酸 B. 对氨基水杨酸钠 C. 对乙酰氨基酚 D. 普鲁卡因 E. 苯佐卡因,相关练习题,96：81（99：72）. 亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（ ） A. 添加Br B. 生成NO+Br ，加快反应速度 C生成HBr D. 生成Br2 E. 抑制反应进行,相关练习题,95：75中国药典所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（ ） A. 电位法 B. 永停法 C. 外指示剂法 D. 内指示剂法 E. 自身指示剂法,相关练习题,96：127亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（ ） A. 自身指示剂法 B. 内指示剂法 C. 永停法 D. 外指示剂法 E. 电位法,相关
14、练习题,例1. ChP（2000）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（ ） A. 自身指示终点法 B. 电位法指示终点 C. 永停滴定法 D. 氧化还原指示剂法 E. 酸碱指示剂法,相关练习题,例3. 盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（） A. 强酸 B. 加入适量溴化钾 C. 室温（1030）下滴定 D. 滴定管尖端深入液面 E. 永停法指示终点,相关练习题,练习与思考,A型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C.水杨酸 D.对氨基苯甲酸 E. 氨基酚 2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨
15、基酚 C. 对氨基酚 D.苯甲酸 E.苯酚 3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C. 对氨基酚 D.酮体 E. 苯甲酸,B型题,A。硫酸铜反应 B.氧化反应 C. 还原反应 D.水解后重氮化-偶合反应 E. 重氮化-偶合反应1. 盐酸利多卡因 2. 肾上腺素3. 盐酸普鲁卡因4对乙酰氨基酚,A,B,E,D,练习与思考,A.溴量法 B. 紫外分光光度法 C. 亚硝酸钠滴定法 D. RP-HPLC法 E. 非水滴定法 5. 盐酸去氧肾上腺素 6. 肾上腺素注射液 7. 盐酸普鲁卡因,A,D,C,练习与思考,X型题,1. 直接能与FeCl3产生颜色反应的药物有
16、 A。盐酸普鲁卡因 B. 盐酸去氧肾上腺素 C. 对乙酰氨基酚 D. 盐酸利多卡因 E. 盐酸丁卡因2. 直接和水解后能发生重氮化-偶合反应的药物有 A。盐酸丁卡因 B. 盐酸普鲁卡因 C. 对乙酰氨基酚 D. 对氨基酚 E. 盐酸肾上腺素,练习与思考,练习题,根据胺类药物的结构，可把该类药物分成几大类？各类药物的结构特征是什么？ 用亚硝酸钠法测定芳胺类药物时，为什么要加溴化钾？解析其作用原理. 3. 如何用化学方法区别普鲁卡因、丁卡因？ 对乙酰氨基酚、肾上腺素？ 试述溴量法测定盐酸去氧肾上腺素的原理、滴定当量和含量计算。 盐酸丁卡因和盐酸利多卡因的含量测定为什么不用亚硝酸钠法? 解释盐酸普鲁卡因水解产物反应鉴别原理。,
