1、环氧化酶2 及表皮生长因子受体在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义环氧化酶2 及表皮生长因子受体在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义【摘要】 目的 探讨环氧化酶2and epidermal groth factor receptor in tumor tissues and explore the effect of COX2 and EGFR in NSCLC development. Methods The expression of COX2 and EGFR as detected by immunohistochemical technique in 56 cases of nons
2、mall cell lung cancer and in 20 cases of normal lung tissues. Results The expression of COX2 and EGFR in NSCLC as significantly higher than that in normal lung tissues , the positive expression rate of COX2 and EGFR being 64.2% and 67.8%, respectively. The expression of COX2 and EGFR in NSCLC as ass
3、ociated ith clinical stage, histologic grade, tumor pathological type and lymponode metastasis . The expression of COX2 and EGFR in stage III and stage IV of NSCLC as significantly higher than that in stage I and stage II of NSCLC. The expression of COX2 and EGFR in the poorlydifferentiated NSCLC as
4、 significantly higher than that in the elldifferentiated NSCLC, and lymponode metastasis in NSCLC as higher than nonlymponode metastasis. The expression of COX2 in adenocarcinoma cell as obviously higher than that in squmaous cell carcinoma; the expression of EGFR in squmaous cell carcinoma as highe
5、r than that in adenocarcinoma cell . The positive correlation as found beteen COX2 and EGFR. Conclusion The experiment suggests that COX2 and EGFR play roles in oncogenesis and progression of NSCLC. Therefore, the expression of COX2 and EGFR seems to be a useful tumor marker for patients ith NSCLC a
6、nd can be used to evaluate the tumor biological behavior and prognosis.KEY WORDS: cyclooxygenase; epidermal groth factor receptor; nonsmall cell lung cancer肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和病死率呈明显上升趋势，已位居肿瘤第一位。近年来发现环氧化酶2 与肺癌的发生发展密切相关。表皮生长因子受体是一种细胞膜表面的糖蛋白受体，属于I型受体酪氨酸激酶超家族的成员之一，EGFR 信号转导通道的激活与细胞恶性转化过程相关。本研究采用免疫组化法检测
7、人非小细胞肺癌组织中 COX2 和 EGFR的表达，探讨其在肺癌发生发展过程中的作用。1 材料与方法1.1 材料 标本来自我院肺癌切除标本和电子气管镜活检的非小细胞肺癌癌组织 56例，其中腺癌 22例，鳞癌 34例；男性 42例，女性 14例，年龄 38-75岁，中位年龄 58岁，所有患者均未接受化疗、放疗等特殊治疗。按 WHO 2000年标准行病理学分组：低分化癌 19例，中高分化 37例，以 1977年 UICC标准进行 TNM分期：期 5例，期 13例，期 18例，期 20例。取材常规 100mL/L甲醛固定、石腊包埋，切片厚度 5m，取同期手术非肿瘤病例的肺组织 20例作为对照组。1.
8、2 试剂与方法 山羊抗人 COX2 多克隆抗体，VEGF 单抗由北京中山生物技术有限公司提供，操作按照试剂盒说明书进行。采用辣根过氧化物酶标记 SP法。标本经 100g/L多聚甲醛固定，石腊包埋后连续切片，常规脱腊至水，30mL/L 过氧化氢封闭，微波炉抗原修复后加入 1100 稀释的 COX2 多克隆抗体 4过夜，二抗置室温下 15min，加入辣根酶标记的链霉菌卵白素工作液静置 15min，PBS漂洗后 DAB显色，苏木精复染，逐级乙醇脱水，透明树脂封片。1.3 结果判定 以 PBS代替一抗设定为阴性空白对照，同时用已知阳性标本作为阳性对照。COX2 、EGFR 蛋白主要位于细胞浆中，胞浆中
9、显示黄色颗粒者为阳性表达，COX2 及 EGFR表达以细胞染色强度和细胞阳性百分率进行判定。随机选择 5个高倍视野进行判断：无染色 0分，浅黄色 1分，棕黄色 2分，黄褐色 3分，细胞阳性率 10% 0分，10%-25% 1 分，26%-50% 2 分， 50% 3 分，上述两项相加，0分为阴性，1-2 分为弱阳性，3-4 分为中等阳性，5-6 分为强阳性。1.4 统计学处理 应用 SPSS 11.0统计学软件进行统计分析，率的比较采用 2 检验。相关分析采用 person correlation法，P 0.05为差异有显著性。2 结果2.1 NSCLC组织中 COX2 和 EGFR的表达 见
10、表 1。表 1 NSCLC与对照组 COX2 和 EGFR蛋白表达的比较（略）Table 1 The expression of COX2 and EGFR in NSCLC and normal lung tissues*P 0.01 vs. control group; NSCLC: nonsmall cell lung cancer2.2 COX2 、EGFR 蛋白表达与 NSCLC临床病理特征的关系 COX2 、EGFR 在 NSCLC组织中表达与患者年龄、性别、肿瘤大小无关，与 TNM分期、组织学类型、肿瘤分化程度和有无淋巴转移有关。在 NSCLC组织中，COX2 、EGFR 蛋白表
11、达，III、IV 期肺癌显著高于 I、II 期；低分化癌表达明显高于高分化肺癌；有淋巴结转移肺癌高于无淋巴结转移者，腺癌 COX2 蛋白高于鳞癌，鳞癌 EGFR表达高于腺癌。 表 2 NSCLC病理特征与 COX2 、EGFR 蛋白表达的关系（略）Table 2 The relationship beteen COX2, EGFR and clinicopathological characteristics of NSCLC2.3 COX2 与 EGFR表达的相关性 有 65%的 NSCLC病例 COX2 与EGFR表达一致，两者呈正相关关系。3 讨论环氧化酶是前列腺素合成中的一个重要限速酶
12、。COX2 是可诱导型表达蛋白，被认为是快速反应基因，定位于核膜与内质网，仅在细胞受到刺激时迅速合成，静息时不表达。COX2 主要在肿瘤组织中表达，在正常组织中很少表达，近年来研究发现，COX2 在肺癌发生发展中有重要作用，COX2 在正常肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞未见表达或弱表达，而在支气管上皮的癌前病变和已癌变的支气管上皮表达增强。COX2 与肺癌发生发展关系密切，可能是通过促进肿瘤细胞增殖、抑制凋亡、促进肿瘤新生血管形成等机制发挥作用的 。EGFR 是原癌基因 Cerb1 的表达产物，具有酪氨酸激酶活性。EGFR 与配体表皮生长因子、转化生长因子结合后可激活受体酪氨酸激酶，导致受体本身及细胞内酪氨酸残基的磷酸化，从而引起细胞分裂增值，Piyathilake 用免疫组化检测肺癌组织中 EGFR发现存在高表达。EGF
