1、14 坐直亟堕医堂 生 旦筮 鲞苤 u山China J Prev Med，February 2005，Vol 31，No1 小鼠急性酒精性肝损伤模型的建立及应用 赵敏，池莉平，王凤岩，杨杏芬，黄俊明 【摘要】 目的建立小鼠急性酒精性肝损伤模型，并将该模型应用于保护酒精性肝损伤功能的 保健食品的筛选与评价。方法用体积分数为5o的乙醇造成肝损伤模型。实验分4个实验组和1 个对照组，即12mr(ksbw)乙醇灌胃后禁食6、8、10、12 h处死动物；空白对照组给予蒸馏水，禁食12 h 处死动物。取动物肝脏，冰冻切片、苏丹染色，进行病理组织学检查。依据 005)(表3)，表明样品对受试动物体重无明显
2、影响。 222 样品对小鼠肝匀浆中MDA、GSHPX和TG 含量的影响 样品对小鼠肝匀浆中MDA、GSHPX 和TG含量的影响见表3。低、高剂量组MDA含量 与阳性对照组比较降低，差异有统计学意义(P 005)。各剂量组GSHPX含量与阳性对照组比较 均升高，差异有统计学意义(P005或P001)。 各剂量组肝匀浆中TG含量与阳性对照组比较，差 异无统计学意义，表明样品对受试动物肝匀浆中TG 含量无明显影响。 表3样品对肝匀浆中MDA、GSH-PX和TG含量的影响( 4-5) 各剂量组与阳性对照组比较，P005(q检验)，PoOl(q检验) 223样品对小鼠肝脏病理组织学变化(脂肪变 性)的影
3、响样品对小鼠肝脏病理组织学变化(脂肪 变性)的影响见表4。各剂量组冰冻切片观察到脂 肪变性评分低于阳性对照组，差异有统计学意义(P 005或P001)。 表4样品对小鼠肝脏脂肪变性的影响 各剂量组与阳性对照组比较， P005， P001 3讨论 目前，酒精的消费量呈全球性猛增，同时酒精性 肝病(alcoholic liver disease， )的发病亦见明显增 加。我们建立小鼠急性酒精性肝损伤模型的目的是 为了快速准确地筛选对酒精性肝损伤有辅助保护作 用的保健食品。急性酒精性肝损伤的机理为机体大 量摄入乙醇后，在乙醇脱氢酶的催化下大量脱氢氧 化，使三羧循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪 代谢
4、，乙醇可致 磷酸甘油增多而促进甘油三酯合 成，致使脂肪在肝细胞内沉积u ；同时乙醇能激活氧 分子，产生氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化及 体内还原型谷胱甘肽的耗竭【2-5J。酒精性脂肪肝是 酒精性肝病的早期表现。 目前国内外关于急性酒精性肝损伤模型的造模 方法主要有两种：一是用56度白酒灌胃，每次7 ml ，每日2次，共110 d；二是腹腔注射一定浓度的 乙醇，每次20 mlkg，每日2次，共l10 d。据赵静 波等 J研究发现制作大鼠急性酒精性肝损伤模型， 灌胃法优于腹腔注射法，因为后者死亡率高，且不符 合人类饮酒习惯。我们采用经口一次给予小鼠体积 分数为50的乙醇(分析纯)，灌胃量为12
5、ml(kg。 bw)，禁食12 h，一次即可出现酒精性肝损伤的早期 表现，呈典型的肝细胞大泡性脂变L 。本研究是在 卫生部颁发的保健食品检验与评价技术规范中对 “化学性肝损伤有辅助保护功能”的基础上L8J，对小 鼠以乙醇染毒后禁食的时间进行细化和详细观察。 研究表明体积分数为50的乙醇灌胃后禁食12 h 可以快速诱导肝损伤模型，可见典型的肝细胞大泡 维普资讯 http:/ 直亟堕匿堂2 生 旦筮 鲞筮 tIl cllina J Prev Med，Fe 2005，v0l 31，No1 性脂变。禁食可以导致糖原含量降低，脂肪被转运 到肝细胞进行糖原异生，有利于肝细胞脂肪动员。 禁食与乙醇灌胃在急性
6、酒精性肝损伤造模中的同时 使用，对肝细胞损伤可能产生协同作用，有利于诱导 急性肝损伤模型的建立。此外，在造模过程中，不采 用市售白酒是为了减少白酒中杂质的干扰。 用该模型对护肝功能保健食品进行测试，并依 据保健食品功能学评价程序和检验方法)(2003)的 判断标准进行评价，结果显示受试样品对酒精性肝 损伤具有一定的保护作用。本研究改良的造模方法 经多次重复试验验证，具有良好的重现性，是对卫生 部颁发的技术规范方法的细化，值得推广实施。 参考文献： 1杨光华病理学M北京：人民卫生出版社，200114 17 2Preedy VR，RemY ME，Pard VB，et a1Protein metab
7、ofism in alco- holism：effects on specific tissues and the whole bodyJNutrition， 1999，15(78)：604608 【3J Porta EADietaryo11 ofoxidatived essinalcoholicliverdis。 ease in胁JJ Nutr，1997，1 (5 supp1)：$912一S015 【4J Eaton S，Reool CO，BartIett KMultiple biochemical effects in the pathogenesis of alcoholic fatty
8、 liverJFan“J Clin Invest，1997， (9)：719722 5YokoyamaH，Ishii HRecent pr 商0nin researchalcdolicliv el“diseaseJNippon Rinsho，1997，55(20)：479490 6赵静波，王泰龄，张晶，等大鼠急性酒精性肝损伤模型分析 J中日友好医院学报，1996，10(1)：1719 7江正辉，王泰龄酒精性肝病M北京：中国医药科技出版 社。2001100107 8中华人民共和国卫生部保健食品检验与评价技术规范(加 年)S2OO31415 (收稿日期,2004一傩一 ) (本文编辑：刘惠玲) 一
9、起误食野生毒蕈引起食物中毒的调查报告 蔡宗顺 中图分类号：R1553 文献标识码：B 文章编号：16715039(2005)01001701 2003年9月8日四川省木里县鸭嘴牧场牧民新村建筑 工地民工11人因误食野生毒蕈2o30 min后，先后出现恶 心、呕吐、腹痛、腹泻、言语不清、视力模糊、心悸等中毒症状， 被及时送往木里县人民医院，经医院全力抢救，病人均痊愈 出院。现将调查情况报道如下。 1流行病学调查 11中毒经过 2003年9月8日四川省木里县鸭嘴牧场牧民新村建筑 工地民工到附近山上采野生蕈，共采牛干蕈、沙木耳、松茸、 青杠蕈、木耳、见风蓝、扫帚蕈、黄腊伞等十余种。下午19时 左右赵
10、某、王某、杨某3人首先食用煮熟的“见风篮”，约 20面先后出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等中毒症状。另一工 地8名民工食用十余种混合炒熟的各种野生蕈，30 min后出 现恶心、呕吐、腹痛、腹泻、言语不清、视力模糊、心悸等症状， 被及时送往木里县人民医院治疗。 12可疑食物调查 赵某、王某、杨某3名民工除吃煮熟的野生蕈“见风蓝” 外，未吃其他食物；另外8名民工主要吃“见风蓝、牛干蕈”等 多种混合炒熟的野生蕈，未吃其他食物。在食用后 2o 30 min内先后出现中毒症状，其他工地民工未吃相同野 作者单位：木里县卫生防疫站，四川木里615800 中毒案例 生蕈类，未出现类似症状。 2实验室检查 现场可疑
11、蕈类已吃完，只采集到病人呕吐物和排泻物， 经实验室检验，未培养检查出肠道致病菌。 3临床表现 I1名民工均在食用野生毒蕈2030 mill后，先后出现恶 心、呕吐、腹痛、腹泻、心悸、言语不清、视力模糊、血压下降等 症状，经县人民医院作催吐、抗休克、补液等治疗后全部痊愈 出院。 4讨论 根据流行病学调查、患者中毒后临床表现及患者呕吐 物、排泻物的实验室检验结果，本起事件可判定为一起误食 野生草引起的食物中毒。 木里县野生蕈种类较多，分布广，许多蕈类营养丰富，鲜 美可口，具有较高营养价值，但是某些有毒野生蕈外貌与食 用野生蕈相似，极容易误食而引起中毒。本起中毒事件就是 因为误食野生毒蕈而引起消化系统和神经系统中毒症状。 由于民工中毒后发现和抢救及时，不然会造成严重后果。为 防止类似野生毒草引起的食物中毒发生，各有关部门应采取 电视、广播、宣传专栏、发放宣传单等多种形式广泛宣传野生 蕈相关知识，使广大人民群众提高识别野生蕈和毒蕈能力，使 之达到防止误食野生毒蕈，保护人民群众身体健康的目的o (gt稿日期*20040811) (本文编辑：陈潮燕) 维普资讯 http:/
