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粪便 dna 提取试剂盒.pdf

1、粪便 DNA 提取试剂盒 粪便 DNA 提取试剂盒 (A) 粪便 DNA 提取试剂盒(50T)产品编号: ASD001【产品简介】:该产品适合于从新鲜或冻存的粪便样本中提取各种微生物及宿主基因组 DNA。提取过程无需酚、氯仿等有害溶剂。本试剂盒所提取的 DNA 不含蛋白、核酸酶或其他影响下游实验的抑制物,适合于 PCR、酶切等实验,也可储存于-20备用。【储存条件】:室温存放 (15-30),保质期 12 个月。【试剂盒组成】:1. NL;2. IA;3. BB;4. WB;5. TE;6. M-beads.【注意事项】:1. 试剂盒所有组分严禁接触皮肤和吞食;若引起皮肤烧伤,请用肥皂洗涤,

2、并用大量的自来水冲洗,就医。2. 请仔细阅读说明书,熟悉操作规程。3. 熟悉 GS-Key 操作规程。(详见 GS-Key 用户手册)4. 按试剂瓶标签上说明,向 WB-中加入指定体积的 100%乙醇。5. 除特别说明,本试剂盒应在 15-30进行操作。【警告】:使用本试剂盒时请佩戴护眼罩、手套,避免与皮肤接触。【所需试剂和设备】:根据实验目的不同,用户需要自备下列产品:1. 多功能 GS-Key( EQ160820);2. 2 ml 裂解试管(U 或 V 型管 );3. 样品裂解反应板(GS-Key 专用);4. U 型管架;5. 移液枪;6. 移液枪头;7. GS-Key 磁套;8. 70

3、%乙醇;9. 100%异丙醇;10. 100%乙醇。【准备程序】:1. 取 7 支 2mLU 型管,标记序号 1-7。2. 管 2 中称取 100mg IA。3. 管 3 中加入 100L BB。4. 管 4 中加入 650L WB。5. 管 5 中加入 600L 70% 乙醇。6. 管 6 中加入 600L 70% 乙醇。7. 管 7 中加入 100L TE。【分离程序】:1. 称取 100-200mg 粪便样本置于管 1 内。2. 加入 1.2ml NL 于管 1, 用 GS-key 以 5000rpm 搅拌 50 秒或搅拌到均匀状态。注意:对于极少数出现 DNA 降解的样本,本步处理时间

4、严格控制在 50 秒内,且可将 NL 在 70预热后再使用,3. 70孵育 10 分钟。注意:为提高 DNA 产量,可延长孵育时间,最长不超过 40 分钟;对于难以裂解的微生物,可提高孵育温度到 90,孵育时间为 10 分钟4. 取出管 1,室温下冷却 3-5 分钟,加入 100l 无水乙醇并混匀,13500rpm 离心 2 分钟。5. 吸取 1ml 上清到管 2,用 GS-key 以 5000rpm 搅拌 50 秒,室温放置 1 分钟,13500rpm 离心 5 分钟。注意:GS-key 搅拌样本时,应轻轻接触管底部,以确保悬浮均匀6. 从管 2 小心吸取 500-600l 中间相液体于管

5、3 内,加入一滴充分悬浮的 M-beads,混合均匀。7. 再加入 490l 异丙醇并混匀,静置 5 分钟。8. 用 GS-Key 转移 M-beads 于管 4 内,以 4200rpm 洗涤 30 秒。9. 用 GS-Key 转移 M-beads 于管 5 内,以 4200rpm 洗涤 30 秒。10. 用 GS-Key 转移 M-beads 于管 6 内,以 4200rpm 洗涤 30 秒。若第 6 步吸入少量可见杂质,可在本步洗涤完成后去除:提供磁场吸附磁珠,继续洗涤 5 秒,快速提出即可1 2粪便 DNA 提取试剂盒 粪便 DNA 提取试剂盒 (A) 11. 用 GS-Key 脱水功

6、能(4200rpm)5-10 秒钟脱除残留乙醇;将 M-beads 转移到管 7 中,孵育 10-20秒。12. 用 GS-Key 移除 M-beads,核酸保留在 TE Buffer 内。【核酸提取量随样本的不同而差异较大。以下数据为使用本试剂盒提取粪便核酸的效果】: 样 本 样 品 量 产 量 A260nm/A280nm人 1 190mg 2.41 g 2.02人 2 180mg 5.81 g 2.12人 3 109mg 17.8 g 2.06大 鼠 112mg 15.9 g 2.11小 鼠 197mg 18.7 g 2.08鹅 200mg 4.8 g 2.04猪 200mg 11.2 g 1.98牛 195mg 1.7 g 2.01兔 子 197mg 0.4 g 1.9243【订购信息】:地址: 北京市海淀区创业路 18 号 邮编:100085网址: 邮箱:电话:4007050668 手机:18618152811人粪便基因组 DNA h(人) 人中心蛋白基因 3 PCR 产物 h(人)(约 500bp)细菌 16S rDNA PCR 产物 (1460bp)h(人)、m(鼠)、p(猪)、c(奶牛)、r(兔子)、g(鹅)

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