1、1随堂真题演练 35 基因工程及其安全性(2017高考全国卷)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：(1)在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的 mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是_。提取 RNA 时，提取液中需添加 RNA 酶抑制剂，其目的是_。(2)以 mRNA 为材料可以获得 cDNA，其原理是_。(3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是_(答出两点即可)。(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA 连接
2、酶催化形成的化学键是_。(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是_。解析：(1)在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的 mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是相对于老叶而言嫩叶组织细胞更容易被破碎。提取 RNA 时，提取液中需添加 RNA 酶抑制剂，其目的是防止 RNA 降解。(2)以 mRNA 为材料获得 cDNA 的原理是在逆转录酶的作用下，以 mRNA 为模板按照碱基互补配对的原则可以合成 cDNA。(3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细
3、胞，原因是目的基因无复制原点且目的基因无表达所需启动子。(4)DNA 连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键。(5)若获得的转基因植株不具备所期望的性状表现，根据中心法则分析，其可能的原因是目的基因的转录或翻译异常。答案：(1)嫩叶组织细胞易破碎 防止 RNA 降解 (2)在逆转录酶的作用下，以 mRNA 为模板按照碱基互补配对的原则可以合成 cDNA (3)目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子 (4)磷酸二酯键 (5)目的基因的转录或翻译异常(2017高考全国卷)编码蛋白甲的 DNA 序列(序列甲)由 A、B、C、D、E 五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图 1
4、 所示。2回答下列问题：(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的 DNA 序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA)，则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙，原因是_。(2)某同学在用 PCR 技术获取 DNA 片段 B 或 D 的过程中，在 PCR 反应体系中加入了 DNA 聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为_，加入了_作为合成 DNA 的原料。(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激 T 淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含 T 淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、
5、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测 T 淋巴细胞浓度，结果如图 2。由图 2 可知，当细胞浓度达到 a 时，添加蛋白乙的培养液中 T 淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使 T 淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是_。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的 CO2浓度，CO 2的作用是_。仅根据图 1、图 2 可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少_(填“A” “B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段，则会降低其刺激 T 淋巴细胞增殖的效果。解析：(1)若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的 DNA 序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA)，则转录出的 mRNA 上缺少起始密码子，故不能翻译
6、出蛋白乙。(2)使用 PCR 技术获取 DNA 片段时，应在 PCR 反应体系中添加引物、耐高温的 DNA 聚合酶、模板、dNTP 作为原料。(3)T 淋巴细胞浓度之所以不再增加，是因为细胞间出现接触抑制，因此若要使 T 淋巴细胞继续增殖，需要对贴满瓶壁的细胞使用胰蛋白酶处理，然后分瓶培养，即细胞传代培养。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的 CO2浓度，以维持培养液的 pH。据图分析，蛋白丙与对照接近说明 B、D 片段对于 T 淋巴细胞增殖不是非常重要，蛋白甲和乙对 T 淋巴细胞的增殖都有较大影响，甲、乙两种蛋白中共同的片段是 C，所以缺少 C 片段会降低其刺激 T 淋巴细胞增殖的效果。
7、答案：(1)编码乙的 DNA 序列起始端无 ATG，转录出的 mRNA 无起始密码子 (2)模板 dNTP (3)进行细胞传代培养 维持培养液的 pH C(高考新课标全国卷)阅读如下资料：资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠” ；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。资料乙：T 4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码 T4溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的 T4溶菌酶第 3 位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第 97 位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了 T4溶菌酶的耐热性。资料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发
8、育成的胚胎移植到兔乙体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。3回答下列问题：(1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用_法。构建基因表达载体常用的工具酶是_和_。在培育有些转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是_。(2)资料乙中的技术属于_工程的范畴，该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对_进行改造，或制造一种_的技术。在该实例中，引起 T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的_序列发生了改变。(3)资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到_种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内，
9、使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中，兔甲称为_体，兔乙称为_体。解析：(1)小鼠细胞为动物细胞，将基因表达载体导入动物细胞常用的方法是显微注射法；构建基因表达载体常用的工具酶是限制酶和 DNA 连接酶；将基因表达载体导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，农杆菌的作用是作为载体，将目的基因导入受体细胞。(2)从资料乙中可以得出是对基因进行改造，结果是得到耐热性提高的蛋白质，因此属于蛋白质工程的范畴，该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新蛋白质的技术。对基因进行改造后，第 3 位的异亮氨酸变为半胱氨酸，该半胱氨酸与第 97 位的
10、半胱氨酸之间形成二硫键，引起了空间结构的改变，所以最终是由于氨基酸序列的改变导致了空间结构的改变。(3)胚胎工程中胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。资料丙中甲兔提供受精卵，所以甲兔是供体；胚胎在乙兔子宫内发育，所以乙兔为受体。答案：(1)显微注射 限制酶 DNA 连接酶农杆菌可感染植物，将目的基因转移到受体细胞中(2)蛋白质 现有的蛋白质 新蛋白质 氨基酸(3)同 供 受课时作业1DNA 是丰富多彩的生命现象的“剧本” 。现在人们借助生物科学技术可以对“剧本”进行“拷贝”或“改编”
11、 。据图回答下列问题：(1)催化过程的酶是_，经过程产生的 DNA 片段末端的形式为_。(2)催化过程的酶是_，与催化过程的酶相比较，该酶的专一性_(填“较强”或“较弱”)。(3)催化过程的酶是_，实现该过程还可以采用的方法是_。4(4)催化过程的酶是_，该过程体现了 DNA 复制_的特点。答案：(1)限制酶 黏性末端 (2)DNA 连接酶 较弱 (3)解旋酶 加热 (4)DNA 聚合酶 半保留复制、边解旋边复制2(2018辽宁五校协作体高三联考)白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中，使其分泌出有活性的白细胞介素。请据图回答下列问题：(1)为增加白细胞介素基
12、因的数量，可使用_技术，但前提是必须知道基因的部分序列，目的是_。(2)在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用_处理酵母菌，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为_。在表达过程中，启动子需与_识别和结合，从而驱动转录过程。(3)在体液免疫过程中，白细胞介素是由_细胞分泌的，为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母菌细胞作为受体细胞，可能原因是_。(4)在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在 DNA 分子上均有多个限制酶的酶切位点，图示过程获得有效表达的重组载体使用了 EcoR和 EcoR 52 两种限制酶，与使用单一的限制酶相比，其优点是_。解析：(1)基
13、因工程中，扩增目的基因利用的是 PCR 技术，但前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便设计引物。(2)在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用 Ca2 处理酵母菌，使酵母菌细胞处于感受态，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程称为转化。在表达过程中，启动子需与 RNA 聚合酶识别和结合，从而驱动转录过程。(3)在体液免疫过程中，白细胞介素是由 T 淋巴细胞分泌的；由于细菌属于原核生物，细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器，因此为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母菌细胞作为受体细胞。(4)在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在的 DNA 分子上
14、均有多个限制酶的酶切位点，图示过程获得有效表达的重组载体使用了EcoR和 EcoR 52 两种限制酶，与使用单一的限制酶相比，其优点是能防止目的基因、表达载体发生自身环化或者目的基因反向接入分泌型表达载体中。5答案：(1)PCR 设计引物 (2)Ca 2 转化 RNA 聚合酶 (3)T 淋巴 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器 (4)能防止目的基因、表达载体发生自身环化或者目的基因反向接入分泌型表达载体中3(2018德州高三调研)凡是具有抗原性、接种于机体可产生特异性免疫、可抵抗传染病的发生和流行的物质均可称为疫苗。以下是三代乙肝疫苗的生产原理示意图，回答下列问题。(1)目前
15、临床使用的乙肝疫苗是第二代疫苗。图中外衣壳蛋白基因 A 的大量扩增可通过_技术，需要用到的一种重要酶是_和_种引物。构建含基因 A 的重组质粒需要用到的工具酶是_。(2)据信息和所学知识分析：第一代疫苗基本处于淘汰的原因是：_。(3)结合图中第二代、第三代疫苗的化学本质，分析推测哪一代疫苗利于运输及其原因：_。(4)处源 DNA 进入机体后，如果整合到人体基因组中可能会引起_和_发生突变而导致机体癌变，这也是第三代疫苗可能存在的安全隐患，目前正在研究中。解析：(1)目的基因大量扩增可通过 PCR 技术，该过程需要热稳定 DNA 聚合酶。由于 DNA 的结构特点是两条链反向平行，因此扩增过程需要
16、 2 种引物。构建基因表达载体需要用到的工具酶是限制酶和 DNA 连接酶。(2)第一代疫苗用的是减毒或灭活的病毒，病毒有可能恢复致病性或引起血源性疾病。(3)从图中分析，第三代疫苗要比第二代疫苗更有利于运输，因为第三代疫苗本质是 DNA，第二代疫苗本质是蛋白质，DNA 的稳定性比蛋白质高。(4)细胞癌变的原因是原癌基因和抑癌基因发生突变。答案：(1)PCR 热稳定 DNA 聚合酶(或 Taq DNA 聚合酶) 2 限制酶与 DNA 连接酶 (2)有引起血源性疾病的嫌疑(或病毒有可能恢复致病性) (3)第三代疫苗更有利于运输，因为第三代疫苗的本质是 DNA，第二代疫苗的本质是蛋白质，DNA 稳定
17、性比蛋白质高 (4)原癌基因 抑癌基因4(2016高考江苏卷)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：限制酶 BamH Bcl Sau3A Hind6识别序列及切割位点 GGATCCCCTAGG TGATCAACTAGT GATCCTAG AAGCTTTTCGAA(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用_两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_酶作用后获得重组质粒。(2)若 BamH酶切的 DNA 末端与 Bcl酶切的 DNA 末端连接，连接部位的 6 个碱基对序列为_，对于该部位，这两
18、种酶_(填“都能” “都不能”或“只有一种能”)切开。(3)若用 Sau3A切图 1 质粒最多可能获得_种大小不同的 DNA 片段。解析：(1)选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但 BamH可能使质粒中标记基因丢失，因此只能选 Bcl和 Hind。酶切后的载体和目的基因片段，通过 DNA 连接酶作用后获得重组质粒。(2)根据 BamH和 Bcl的酶切位点， BamH酶切的 DNA 末端与 Bcl酶切的 DNA 末端连接，在连接部位的 6 个碱基对序列为Error! ，与这两种酶的酶切位点均不同。(G GATC AC CTAG T)(3)根据 BamH、 Bcl和 Sau3A的酶切位点，
19、 Sau3A 在质粒上有三个酶切位点，完全酶切可得到记为 A、B、C 三种片段，若部分位点被切开，可得到 AB、AC、BC、ABC 四种片段，所以用 Sau3A切图 1 质粒最多可能获得 7 种大小不同的 DNA 片段。答案：(1) Bcl和 Hind DNA 连接(2)Error! 都不能 (3)7(G GATC AC CTAG T)5下图表示科学家培育耐寒生物的过程，请回答下列问题：cDNA 文库 受体细胞耐寒生 获 取 抗 冻 蛋 白 基 因 更 多 抗 冻 蛋 白 基 因 构 建 导 入 7物(1)从 cDNA 文库中获取的目的基因_(填“有”或“无”)启动子。实现过程常用_技术，该技
20、术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成_。(2)表示_，其中标记基因的作用是_。(3)转基因技术是否成功，需要对受体细胞进行分子水平的检测，首先是用 DNA 分子杂交技术检测受体细胞染色体上的 DNA 上是否插入目的基因，这种方法需要遵循_原则。(4)若要培育抗冻能力强的转基因羊，可将鱼的抗冻蛋白基因导入羊的_中，培育该转基因羊的最后一道“工序”是胚胎工程的_技术。解析：(1)用某种生物发育的某个时期的 mRNA 逆转录产生的多种互补 DNA 片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫这种生物的 cDNA 文库，启动子不能逆转录，由逆转录获得的 cDNA 中没有启动
21、子。获得更多的目的基因的方法是 PCR 技术，该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。(2)表示基因表达载体，其中标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因。(3)DNA 分子杂交技术遵循碱基互补配对原则。(4)培养转基因动物时，受体细胞一般为受精卵，培育该转基因羊的最后一道“工序”是胚胎移植。答案：(1)无 PCR 引物(2)基因表达载体 鉴别受体细胞中是否含有目的基因(3)碱基互补配对(4)受精卵 胚胎移植6科学家通过利用 PCR 定点突变技术改造 Rubisco 酶基因，提高了光合作用过程中Rubisco 酶对 CO2的亲和力，从而显著提高了植物的光合作用速率。
22、请回答下列问题：(1)PCR 过程所依据的原理是_；扩增过程需要加入_酶。(2)启动子是一段有特殊结构的 DNA 片段，其作用是_。目的基因能在不同生物体内正常表达原来的蛋白质，说明整个生物界_。PCR 定点突变技术属于_的范畴。(3)可利用定点突变的 DNA 构建基因表达载体。常用_将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的_技术，来最终获得转基因植物。解析：(1)PCR 依据的原理是 DNA 双链复制；扩增过程需要加入耐高温的 DNA 聚合(或 TaqDNA聚合)酶。(2)启动子是 RNA 聚合酶识别和结合部位，可驱动基因转录出 mRNA；因生物界共用一套遗传密码，所以目的基因可
23、以在不同细胞内表达合成相同蛋白质。(3)常用农杆菌转8化法将基因表达载体导入植物细胞，借助于植物组织培养技术，获得转基因植物。答案：(1)DNA 双链复制 耐高温的 DNA 聚合(或 TaqDNA 聚合)(2)RNA 聚合酶识别和结合部位，可驱动基因转录出 mRNA 共用一套密码子 蛋白质工程(3)农杆菌转化法 植物组织培养1随堂真题演练 36 细胞工程(高考新课标标全国卷)甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分 A，乙含有效成分 B。某研究小组拟培育同时含有 A 和 B 的新型药用植物。回答下列问题：(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用_酶和_酶去除细胞壁，
24、获得具有活力的_，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_组织，然后经过_形成完整的杂种植株。这种培育技术称为_。(2)上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_。假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是_。(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的_等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。解析：(1)植物体细胞杂交的过程包括植物细胞融合和植物组织培养，其过程依次为酶解法去除植物细胞的细胞壁、用物理或化学法诱导原生质体融合、杂种细胞再生出细胞壁、杂种细胞经植物组织培养(脱分化形成愈伤组织，再分化形成幼根和芽进而形成
25、完整植株)培育成完整植株。其中，酶解法去除植物细胞的细胞壁利用了酶的专一性，选择纤维素酶和果胶酶，水解植物细胞的细胞壁的主要成分纤维素和果胶，暴露出有活力的原生质体。(2)多倍体是指体细胞中含有三个或三个以上的染色体组的个体。甲和乙均为二倍体植物，假设二者有性杂交的后代不可育，其原因是该后代在进行减数第一次分裂过程中，由于没有同源染色体，联会出现紊乱，不能产生可育的配子。而植物体细胞杂交产生的杂种植物，细胞内含有原物种体细胞内的染色体，在减数第一次分裂过程中能够进行同源染色体配对，产生可育的配子。(3)经植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等，用人工薄膜包装后可得到人工种子。答案：(1
26、)纤维素 果胶 原生质体 愈伤 再分化(或分化) 植物体细胞杂交技术 (2)体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体(其他合理答案也可) 在减数分裂过程中，前者染色体联会异常，而后者染色体联会正常(其他合理答案也可) (3)胚状体、不定芽、顶芽、腋芽(答对其中一个即可)(2016高考全国卷)如图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。2回答下列问题：(1)图中 A 表示正常细胞核，染色体数为 2n，则其性染色体的组成可为_。过程表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_的方法。代表的过程是_。(2)经过多次传代后，供体细胞中_的稳定性会降低。因
27、此，选材时必须关注传代次数。(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是_。(4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了_。解析：(1)核移植过程中，供体的体细胞中性染色体组成可为 XX 或 XY；去核时常采用显微操作的方法；图示过程表示胚胎移植。(2)细胞培养过程中，经过多次传代培养，细胞中遗传物质的稳定性会降低。(3)由于卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响，所以克隆动物与供体性状不完全相同。(4)克隆动物的成功获得证明了已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性。答案：(1)XX 或 XY 显微操作 胚胎移植(2)遗
28、传物质 (3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响 (4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性(高考新课标全国卷)某研究者用抗原(A)分别免疫 3 只同种小鼠(X、Y 和 Z)，每只小鼠免疫 5 次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的 B 淋巴细胞(染色体数目 40 条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目 60 条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗 A 抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：(1)制备融合所需的 B
29、淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到 16 000 以上，则小3鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的 X、Y、Z 这 3 只免疫小鼠中，最适合用于制备 B 淋巴细胞的是_小鼠，理由是_。(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有_，体系中出现多种类型细胞的原因是_。(3)杂交瘤细胞中有_个细胞核，染色体数目最多是_条。(4)未融合的 B 淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是_。解析：(1)据图分析可知，第四次注射后 X、Y、Z 小鼠的血清抗体效价几乎都达到 16 000 以上，小鼠 Y 的血清抗体的效价最高，最适合用于制备单克
30、隆抗体。(2)融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨髓瘤细胞的自身融合细胞和 B 淋巴细胞的自身融合细胞。细胞的融合是随机的，并且不可能所有细胞都融合，故体系中会出现多种类型的细胞。(3)动物细胞融合后形成的是具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。杂交瘤细胞的细胞核中的染色体数目为 4060100 条。(4)正常细胞的分裂次数是有限的，且经过免疫的 B淋巴细胞高度分化，不能无限增殖，而是经多次传代培养后逐渐衰老死亡。答案：(1)4 Y Y 小鼠的血清抗体效价最高 (2)B 淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞 细胞融合是随机的，且融合率达不到 100%(3)
31、1 100 (4)不能无限增殖课时作业1传统的人工繁殖兰花的方法是分株繁殖和种子繁殖，随着科学技术的进步，人们开始采用“组织培养繁殖兰花” ，如图所示，请据图回答下列问题： (1)图中过程为_，的名称为_，其细胞与叶肉细胞相比，不含有的细胞器是_。(2)兰花的叶肉细胞之所以能培养为新个体，是因为细胞中含有_，具有发育成完整个体的潜能。(3)图中过程为_。与过程相比较，培养基中各种激素的种类_(填“相同”或“不同” ，下同)，各种激素的含量_。4(4)有人想利用植物体细胞杂交技术解决兰花生根速度慢、幼苗生存能力弱的问题，但操作后得到的“韭菜兰花” ，并没有预想中的“繁殖容易，香气浓郁” ，可能的
32、原因是_。答案：(1)脱分化 愈伤组织 叶绿体 (2)本物种的全部遗传信息 (3)再分化 相同 不同 (4)两个物种之间的基因相互影响，导致某些基因无法正常表达2已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性，二室(M)对多室(m)为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。育种工作者利用红果多室(Yymm)番茄植株，采用不同的方法进行了四组实验。请据图回答问题：(1)以上四种育种实验都主要应用了_的原理，培育中发生了脱分化的过程有_。(2)用番茄植株的花粉随机进行有关实验，得到幼苗 B 直接移栽，发育成的番茄植株的基因型和表现型分别是_、_，如果植物体 C 仅是花粉两两随机融合得到的，则
33、植物体 C 的基因型及其比例是_。(3)图中_大部分细胞中染色体数量最少，要保证植物体 B 可以用于生产，培育中过程可使用_处理幼苗。(4)图中植物体_少数细胞中染色体数量最多，培育该植物体的过程称为_，植物体 D 能表现出两个亲本的一些性状，根本原因是_。(5)植物体 A 只表现红果多室，原因是_。答案：(1)植物细胞全能性 (2)Ym 或 ym 无果 YYmmYymmyymm121(3)花粉和幼苗 B 一定浓度的秋水仙素或适当低温(4)D 植物体细胞杂交 具有两个亲本的遗传物质(5)该培育过程中只进行了有丝分裂，且没发生基因突变，完全保持了亲本的遗传性状3(2015高考安徽卷)科研人员采用
34、转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子 IX 医用蛋白，其技术路线如下图。5(1)由过程获得的 A 为_。(2)在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是_。受体应选用_期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生_，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为_。解析：(1)分析图示可知，过程构建的 A 为含目的基因的表达载体。(2)核移植以前，必须去掉受体卵母细胞的核，目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞。受体应该选用处于减数第
35、二次分裂中期的卵母细胞。(3)在进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的外来胚胎基本上不会发生免疫排斥反应。(4)转基因体细胞克隆产生的重组细胞具有全能性，培养产生的含目的基因的成纤维细胞可进行传代培养，因此理论上可获得无限个转基因绵羊。答案：(1)含目的基因的表达载体(2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞M中(3)免疫排斥反应(4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养4(2018重庆万州二中月考)单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用 H7N9 病毒制备单克隆抗体的流程如图所示：(1)过程常用的方法是_。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使
36、小鼠产生_免疫。从小鼠体内分离的细胞是_，细胞应具有的特点是_。(3)体外培养细胞，首先应保证其处于_的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是_。(4)对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和_检测。6(5)若要预防 H7N9 禽流感，可用图中的_作为疫苗。解析：(1)将重组 DNA 导入动物细胞，常用显微注射法。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生相应的浆细胞，这是体液免疫，从小鼠体内分离的细胞 是 B 淋巴细胞(浆细胞或已免疫的 B 淋巴细胞)，将无限增殖的基因导入浆细胞，得到的细胞 应具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(3)体外培养细胞 ，
37、首先应保证其处于无菌、无毒的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是维持培养液的 pH。(4)对于转基因成功的细胞 还要进行克隆化培养和检测(专一)抗体。(5)疫苗为毒性弱的抗原，因此要预防 H7N9 禽流感，可以用图中的抗原蛋白作为疫苗。答案：(1)显微注射法 (2)体液(只答特异性不可) B 淋巴细胞(浆细胞或已免疫的 B 淋巴细胞) 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 (3)无菌、无毒(缺一不可)维持培养液的 pH (4)(专一)抗体 (5)抗原蛋白5(2018湖南长郡中学模拟)动植物细胞工程在农业生产、医药卫生等领域有着广泛的用途。回答下列问题：(1)在将两
38、种植物细胞进行杂交之前，需要用_酶进行处理，若将处理后的细胞放入较高浓度的蔗糖溶液中，会发生_。诱导两种植物细胞融合可以采用物理或化学的方法进行，常用的物理方法有_ (写 2 种即可)。(2)融合的细胞形成愈伤组织，在愈伤组织的培养过程中，当生长素和细胞分裂素的比值_(填“高”或“低”)时，有利于丛芽的分化；通过上述过程获得杂种植株依据的原理是_。(3)在制备单克隆抗体的过程中，融合的结果是出现多种不同的杂交细胞，需要在特定的培养基上进行筛选，从而得到_细胞。单克隆抗体与传统方法获得的抗体相比，具有_的特点，因此广泛用于疾病的诊断等方面。解析：(1)植物体细胞杂交过程有两个关键，一个是在将植物
39、细胞进行杂交之前，必须去除细胞壁，该过程需要用到纤维素酶和果胶酶；另外一个是诱导原生质体的融合，方法包括物理法(离心、振动、电刺激)和化学法(聚乙二醇)。将处理后的细胞放入较高浓度的蔗糖溶液中，会发生渗透作用。(2)在愈伤组织的培养过程中，当生长素和细胞分裂素的比值低时，有利于丛芽的分化；通过题述过程获得杂种植株依据的原理是细胞膜具有一定流动性和植物细胞具有全能性。(3)用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够大量增殖又能产生特异性抗体。与传统方法获得的抗体相比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的特点。答案：(1)纤维素酶和果胶 渗透作用 离心、振动、电激(2)低 细胞膜的流动性、植物细胞具有全能性7(3)杂交瘤 特异性强、灵敏度高、可大量制备
