1、微生物学专业毕业论文 精品论文 中药雄黄微生物浸出及其浸出液对肝癌的体内外抗肿瘤作用研究关键词：雄黄 微生物浸矿 肝癌 氧化亚铁硫杆菌 抗肿瘤作用摘要：雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种
2、水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸
3、(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小
4、鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化
5、二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。正文内容雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用
6、于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130r
7、pm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af
8、对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体
9、外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 E
10、R/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株Acidithiobacill
11、usferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(i
12、As)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，
13、3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗
14、组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途
15、径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1
16、.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得
17、到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，
18、实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af
19、腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本
20、论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用
21、，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时
22、间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较
23、小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利
24、用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果
25、表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、C
26、u、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技
27、术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研
28、究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶
29、性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，
30、比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/m
31、l 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，
32、且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.2
33、1/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进
34、行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同
35、时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤
36、小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.
37、83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，
38、在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条
39、件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性
40、和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠
41、实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO
42、更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常
43、用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出
44、。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体
45、瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌荷瘤小鼠实体瘤组织 H22 细胞的凋亡，在体外条件下，ER/Af 也可以大大提高 H22 细胞的凋亡率，且随着药物浓度的增加其对细胞的凋亡诱导作用愈强。值得注意的是，ER/Af 对荷瘤小鼠的毒副作用较小，与对照组相比没有引起明显的组织毒性病理变化，而且对肿瘤组
46、织具有很强的选择性。ER/Af 治疗组荷瘤小鼠肿瘤组织中砷的蓄积远远大于生理盐水，可达到 57.83.34g/g 约为生理盐水对照组及三氧化二砷(ATO)治疗组的 8 倍左右。 最后，本论文研究了 ER/Af 不同给药途径对正常小鼠的急性毒性，实验结果表明，与 ATO 相比，ER/Af 腹腔给药具有更高的毒性，而静脉及灌胃给药都显示出比 ATO 更低的毒性。腹腔、静脉及灌胃给药 ER/Af 对正常小鼠的半数致死剂量分别为 5.45/、4.21/和 15.83/。 总之，本研究提出了一种微生物法炮制雄黄的新工艺，可以有效地解决雄黄生物利用度低、临床使用量与毒性大等问题，同时也为制备一种水溶性、高
47、效、低毒的新型砷剂提供了一条有效的途径。雄黄是一种常见的矿物中药，主含四硫化四砷(As4S4)，在中医药中具有悠久的医用历史，广泛用于解毒杀虫、燥湿祛痰、截疟和抗肿瘤等。然而，由于雄黄的水不溶性而导致的生物利用度低、毒副作用大以及给药途径单一等缺点严重制约其临床应用。为了解决这一问题，本论文将微生物湿法冶金技术用于雄黄的炮制，采用微生物湿法冶金常用菌株AcidithiobacillusferrooxidansBY3(At.fBY3)对雄黄进行生物化学溶解，释放砷等活性成分，为制备一种水溶性、高效、低毒的新型砷剂提供新的途径。 研究结果表明，在室温 30左右，粒度为 180-200 目，矿浆浓度
48、为 0.5，初始 Fe2+浓度为 1.0g/L，矿浆 pH 值为 2.2，细菌接种量为 20的条件下雄黄微生物浸出效果最好，130rpm 摇瓶浸出 30 天，雄黄中砷的浸出率可达 26.64，比无菌对照提高了约 23 个百分点。At.fBY3 的直接作用在雄黄的生物浸出过程中起到重要作用，加入 1.0g/L 的 Fe2+能够大大促进雄黄中砷的溶出。无机的三价砷(iAs)和五价砷(iAs)是雄黄微生物浸出液(ER/Af)中砷的主要赋存形态，同时存在少量的一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)等有机砷化物。另外，雄黄中富含的 Zn、Cu、Mg、Mn、Fe、Se 等与人体健康密切相关的微量元素在
49、 At.fBY3 存在条件下也能够得到有效浸出。 为了阐明 At.fBY3 用于雄黄炮制的合理性和有效性，本论文研究了 ER/Af 对肝癌的体内外抗肿瘤作用。实验结果表明，0.5-2.0g/ml 砷浓度的 ER/Af 对肝癌细胞株 HepG-2 均具有显著的增殖抑制效应，且呈现出明显的时间和浓度依赖性。体内条件下，ER/Af 对肝癌 H22 实体瘤以及腹水瘤小鼠具有很强的抑瘤作用，3.0mg/ER/Af 腹腔注射给药后对肝癌 H22 腹水瘤小鼠的生命延长率可达 118.8，对实体瘤小鼠肿瘤生长抑制率可达 42.78。分别采用透射电镜技术及流式细胞术研究了 ER/Af对 H22 实体瘤细胞以及体外培养 H22 细胞的凋亡诱导作用，实验结果表明，腹腔给药 ER/Af 能够有效诱导肝癌
