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与花生发育以及抗耐胁迫相关基因的克隆与表达研究.doc

1、生物化学与分子生物学专业毕业论文 精品论文 与花生发育以及抗耐胁迫相关基因的克隆与表达研究关键词:花生 种子 功能基因 基因表达 生物信息学摘要:花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础

2、上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,L

3、EA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因 LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮 10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like

4、 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花序、果针里有少量的或者没有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明显差异,PDH-E1ACPHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT

5、-PCR 技术分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电点、疏水性、信号肽等方面的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19-like 基因可能参与花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、P

6、DH-E1ACPHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。正文内容花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建

7、了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,

8、40 d,50 d和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个LEA 基因 LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮 10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表

9、达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花序、果针里有少量的或者没有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明

10、显差异,PDH-E1ACPHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT-PCR 技术分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电点、疏水性、信号肽等方面的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19

11、-like 基因可能参与花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)

12、本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、P

13、DH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、

14、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花

15、序、果针里有少量的或者没有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明显差异,PDH-E1ACPHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT-PCR 技术分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电

16、点、疏水性、信号肽等方面的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19-like 基因可能参与花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要

17、生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-P

18、CR 技术分析了CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达

19、,但是表达量都不高,在果皮10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、

20、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花序、果针里有少量的或者没有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明显差异,PDH-E1ACPHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT-PCR 技术分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水

21、杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电点、疏水性、信号肽等方面的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19-like 基因可能参与花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世

22、纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能

23、、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里

24、有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-

25、3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花序、果针里有少量的或者没有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明显差异,PDH-E1ACPHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT-PCR 技术分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况

26、下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电点、疏水性、信号肽等方面的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19-like 基因可能参与花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学

27、研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生

28、不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因LEA-5H23 在果皮

29、里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结

30、果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花序、果针里有少量的或者没有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明显差异,PDH-E1ACPHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT-PCR 技术分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、

31、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电点、疏水性、信号肽等方面的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19-like 基因可能参与花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定

32、奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文

33、对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D

34、10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAP

35、DH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花序、果针里有少量的或者没有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明显差异,PDH-E1ACPHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT-PCR 技术

36、分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电点、疏水性、信号肽等方面的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19-like 基因可能参与花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、PDH-E1AC

37、PHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同

38、发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和

39、60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定

40、量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花序、果针里有少量的或者没有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明显差异,PDH-E1AC

41、PHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT-PCR 技术分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电点、疏水性、信号肽等方面的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19-like 基因可能参与

42、花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相

43、关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基

44、因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达

45、,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶、花序、果针均有明显的表达,在根中有微量表达,LEA-5H23 基因在根、茎、叶、花序、果针均没有表达,但在幼果里有明显表达,ACRE19-like 基因在根、茎、叶、花序、果针里有少量的或者没

46、有表达,GAPDH 基因在根、茎、叶、花序、果针中都有表达,表达量没有明显差异,PDH-E1ACPHA 在根、茎、叶、花序、果针里都有表达,但是表达量不高。 3.利用半定量 RT-PCR 技术分析了两个 LEA 基因、ACRE19-like基因在受到外界环境(干旱、低温、水杨酸、ABA、乙烯利)诱导下的表达情况,结果表明:LEA 基因在干旱、低温、水杨酸、ABA 诱导的不同时间情况下有表达,但是表达量不同,ACRE19-like 基因在低温、干旱诱导的情况下有明显的表达,在水杨酸、ABA、乙烯利诱导下的不同时间有不同量的表达。 4.通过生物信息学分析了他们的分子量、等电点、疏水性、信号肽等方面

47、的信息学分析,预测 CEM1 基因可能与花生的果皮发育有关,ACRE19-like 基因可能参与花生抗性调控的信号转导,LEA 基因可能与花生的抗旱功能有关,GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因可能在维持花生物质与能量代谢的稳定方面有重要的调控作用,这为花生基因的功能研究和鉴定奠定了基础。 目前,花生分子生物学研究总体来讲比较薄弱,但发展加快。本研究可丰富花生功能基因组学研究内容,为解决花生生产问题提供理论指导。花生是世界范围内广泛栽培的油料和经济作物,是 21 世纪全球最重要的四大油料作物之一。花生的产量、品质、抗病抗逆性等历来是影响花生产业可持续发展的重要生产问题。这些性状的发育

48、是花生体内基因在一定环境下基因表达调控的结果,尤其与花生种子(收获器官)本身基因的表达调控紧密相关。为了解花生种子的生长发育规律,我们实验室从应用功能基因组学角度先后构建了花生荚果和种子等不同发育时期的全长文库,并对花生种子表达基因做了初步筛选、规模测序和生物信息学分析。在此基础上,本文对所筛选的六个与花生种子发育和抗性相关的基因进行了较深入的研究,研究目的是了解这些相关基因在花生不同器官的表达特征、在种子不同发育阶段的表达模式,以及基因表达与外界胁迫的关系,对基因的结构功能、参与的代谢途径和信号传导网络进行了生物信息学预测,具体研究结果如下: 1.利用半定量 RT-PCR 技术分析了CEM1

49、 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在花生果皮、种皮和胚等器官不同发育阶段(10 d,20 d,30 d,40 d,50 d 和 60 d)的表达模式。CEM1 基因只在花生果实里表达,特别是在果皮里有丰富的表达,LEA-3D10 基因在果皮里有明显表达,在其他组织表达不明显,另一个 LEA 基因LEA-5H23 在果皮里都表达,在胚 40 到 50 天,种皮 50 天明显表达,ACRE19-like 基因在果皮里有丰富的表达,在种皮和胚里有少量表达或者不表达,GAPDH 基因在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,但是表达量都不高,在果皮10 天、胚 40 天里表达稍有明显,PDH-E1ACPHA 在种皮、果皮、胚各个时期都有表达,其中果皮 10 天、60 天、种皮 60 天、胚 40 至 50 天表达稍明显。 2.利用半定量 RT-PCR 技术分析了 CEM1 基因、LEA 基因、ACRE19-like 基因、GAPDH 基因、PDH-E1ACPHA 基因在不同器官(根、茎、叶、花序、果针和幼果)的表达模式。结果表明 CEM1 基因只在幼果里有大量表达,果针里有少量的表达,在根、茎、叶里没有表达,LEA-3D10 基因在茎、叶

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