1、动物学专业毕业论文 精品论文 三丁基锡对雄性小鼠精子发生和成熟的影响关键词：三丁基锡 昆明雄鼠 睾丸 精子发生 附睾功能 精子成熟 毒性效应摘要：本实验以青春期昆明雄鼠为研究对象，通过较低浓度的氯化三丁基锡(Tributyltin chloride，TBTCl)(0.5，5，and50g/kg)灌胃实验，染毒 45 d后，观察 TBT 对生殖系统的毒性效应，探讨其对精子发生及精子成熟损伤的机理和途径。有关精子发生方面的检测指标包括睾丸的组织形态学，睾丸成熟情况、血清促性腺激素和睾丸性激素水平、睾丸细胞凋亡和细胞增殖情况，血清甲状腺激素(T3、T4)水平和睾丸甲状腺激素受体(TRs)表达量(mR
2、NA 水平)；有关精子成熟方面的检测指标包括附睾组织形态，精液质量参数、附睾功能标志物活性(中性 -葡萄糖苷酶和附睾酸性磷酸酶)、精子功能指标以及附睾内特异性表达基因(MMP7 和 TD02)的表达量(mRNA 水平)。 1 TBT 对睾丸精子发生的影响。TBT 处理后雄性小鼠性体比指数没有显著变化，但睾丸组织结构发生明显改变，而且损伤程度随 TBT 剂量增加而加重，在 50g/kg 剂量组，生精细胞排列杂乱、无序，各级生精细胞间出现大量的间隙，大量生精细胞异常脱落进入生精小管管腔。和对照组比较，处理组睾丸睾酮水平呈现出 TBT 剂量依赖性显著升高，雌激素水平呈现剂量依赖性下降趋势，而血清黄体
3、生成素水平以及卵泡刺激素水平较对照组有所下降。运用免疫组织化学和 western-blotting的方法对睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平进行研究，发现随着 TBT 浓度的增加，睾丸内 PCNA 表达量有下降趋势，但与对照组相比较，没有显著性变化。运用 TUNEL 技术检测 TBT 染毒 45 d 对小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，发现各处理组凋亡阳性细胞数与对照组相比有所升高，但差异不显著。TBT 处理后小鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平以及三碘甲腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)比率呈现剂量依赖性显著下降，睾丸 TR mRNA 表达量下调。 2 TBT 对附睾功能以及精子成熟的影响。T
4、BT 处理组小鼠精子密度、存活率和畸形率呈现剂量依赖性显著下降。组织形态学观察显示附睾头部未见明显变化，而体部和尾部可见不同程度的损伤，附睾损伤程度随着处理剂量的增加而逐渐加剧，呈现剂量依赖效应：体部附睾管上皮细胞逐渐稀少，排列疏松，管间间隙变大，腔内精子减少，中浓度组和高浓度组附睾管腔内可见大量精子凝聚；附睾尾部上皮细胞排列疏松，管间间隙逐渐变大，管腔内精子减少，管间结缔组织逐渐减少。TBT处理使附睾上皮特异性分泌物中性 a-葡萄糖苷酶(NAG)活性有所下降，但与对照组相比，差异不显著；附睾酸性磷酸酶(ACP)活性随处理剂量的升高呈下降趋势，但与对照组相比无统计学差异。处理组精子顶体酶活性呈
5、现剂量依赖性显著下降；精子乳酸脱氢酶同工酶-X 活性在高浓度组受到显著抑制。与对照组相比较，5 和 50g/kg TBT 浓度组 MMP7 mRNA 表达量显著下降，TD02 表达量呈现剂量依赖性显著下降。 综上所述，本实验结果表明 TBT 能干扰青春期小鼠精子发生。组织学观察以及睾丸成熟度检查结果表明 TBT 能破坏睾丸组织的正常结构，抑制睾丸发育。TBT 处理能够显著诱导睾丸睾酮水平上升，17- 雌二醇水平下降，血清 LH 和 FSH 水平有所下降，造成生殖内分泌系统紊乱，进而干扰睾丸精子发生。TBT 处理显著降低血清 T3 含量，T3/T4 比率显著下降，TR 表达水平下调，说明 TBT
6、 能干扰甲状腺正常生理机能，进而诱发睾丸生精机能障碍。另外，处理组凋亡细胞数目的增加以及 PCNA 蛋白表达量的降低，提示 TBT可在一定程度诱导睾丸生精细胞凋亡，抑制其增殖，这可能是 TBT 抑制精子发生的潜在机制之一。TBT 干扰精子发生应该是多条途径共同作用的结果。 本实验结果还显示 TBT 能干扰青春期小鼠精子成熟。组织形态学观察结果表明TBT 对附睾组织结构造成损伤。精液常规检测结果显示处理组附睾精子密度下降，畸形率上升，同时精子存活率下降，提示 TBT 可影响哺乳动物精子质量。附睾酸性磷酸酶活性下降很可能与精子畸形率上升有一定关系。精子顶体酶以及乳酸脱氢酶同工酶-X 活性的显著降低
7、，提示精子成熟受到影响，这些精子质量功能指标的变化情况与精液常规检测结果一致，进一步证实 TBT 具有精子毒性。MMP7 和 TD02 mRNA 表达量的显著下降，提示 TBT 可影响附睾内一些基因的表达，而这些基因很可能与附睾的功能或精子成熟有关。以上结果说明 TBT 具有附睾毒性以及精子毒性。TBT 引起的精子数量和质量下降能影响动物的生殖。正文内容本实验以青春期昆明雄鼠为研究对象，通过较低浓度的氯化三丁基锡(Tributyltin chloride，TBTCl)(0.5，5，and50g/kg)灌胃实验，染毒 45 d后，观察 TBT 对生殖系统的毒性效应，探讨其对精子发生及精子成熟损伤
8、的机理和途径。有关精子发生方面的检测指标包括睾丸的组织形态学，睾丸成熟情况、血清促性腺激素和睾丸性激素水平、睾丸细胞凋亡和细胞增殖情况，血清甲状腺激素(T3、T4)水平和睾丸甲状腺激素受体(TRs)表达量(mRNA 水平)；有关精子成熟方面的检测指标包括附睾组织形态，精液质量参数、附睾功能标志物活性(中性 -葡萄糖苷酶和附睾酸性磷酸酶)、精子功能指标以及附睾内特异性表达基因(MMP7 和 TD02)的表达量(mRNA 水平)。 1 TBT 对睾丸精子发生的影响。TBT 处理后雄性小鼠性体比指数没有显著变化，但睾丸组织结构发生明显改变，而且损伤程度随 TBT 剂量增加而加重，在 50g/kg 剂
9、量组，生精细胞排列杂乱、无序，各级生精细胞间出现大量的间隙，大量生精细胞异常脱落进入生精小管管腔。和对照组比较，处理组睾丸睾酮水平呈现出 TBT 剂量依赖性显著升高，雌激素水平呈现剂量依赖性下降趋势，而血清黄体生成素水平以及卵泡刺激素水平较对照组有所下降。运用免疫组织化学和 western-blotting的方法对睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平进行研究，发现随着 TBT 浓度的增加，睾丸内 PCNA 表达量有下降趋势，但与对照组相比较，没有显著性变化。运用 TUNEL 技术检测 TBT 染毒 45 d 对小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，发现各处理组凋亡阳性细胞数与对照组相比有所升高，但差
10、异不显著。TBT 处理后小鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平以及三碘甲腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)比率呈现剂量依赖性显著下降，睾丸 TR mRNA 表达量下调。 2 TBT 对附睾功能以及精子成熟的影响。TBT 处理组小鼠精子密度、存活率和畸形率呈现剂量依赖性显著下降。组织形态学观察显示附睾头部未见明显变化，而体部和尾部可见不同程度的损伤，附睾损伤程度随着处理剂量的增加而逐渐加剧，呈现剂量依赖效应：体部附睾管上皮细胞逐渐稀少，排列疏松，管间间隙变大，腔内精子减少，中浓度组和高浓度组附睾管腔内可见大量精子凝聚；附睾尾部上皮细胞排列疏松，管间间隙逐渐变大，管腔内精子减少，管间结缔组织逐渐减少。
11、TBT处理使附睾上皮特异性分泌物中性 a-葡萄糖苷酶(NAG)活性有所下降，但与对照组相比，差异不显著；附睾酸性磷酸酶(ACP)活性随处理剂量的升高呈下降趋势，但与对照组相比无统计学差异。处理组精子顶体酶活性呈现剂量依赖性显著下降；精子乳酸脱氢酶同工酶-X 活性在高浓度组受到显著抑制。与对照组相比较，5 和 50g/kg TBT 浓度组 MMP7 mRNA 表达量显著下降，TD02 表达量呈现剂量依赖性显著下降。 综上所述，本实验结果表明 TBT 能干扰青春期小鼠精子发生。组织学观察以及睾丸成熟度检查结果表明 TBT 能破坏睾丸组织的正常结构，抑制睾丸发育。TBT 处理能够显著诱导睾丸睾酮水平
12、上升，17- 雌二醇水平下降，血清 LH 和 FSH 水平有所下降，造成生殖内分泌系统紊乱，进而干扰睾丸精子发生。TBT 处理显著降低血清 T3 含量，T3/T4 比率显著下降，TR 表达水平下调，说明 TBT 能干扰甲状腺正常生理机能，进而诱发睾丸生精机能障碍。另外，处理组凋亡细胞数目的增加以及 PCNA 蛋白表达量的降低，提示 TBT可在一定程度诱导睾丸生精细胞凋亡，抑制其增殖，这可能是 TBT 抑制精子发生的潜在机制之一。TBT 干扰精子发生应该是多条途径共同作用的结果。 本实验结果还显示 TBT 能干扰青春期小鼠精子成熟。组织形态学观察结果表明TBT 对附睾组织结构造成损伤。精液常规检
13、测结果显示处理组附睾精子密度下降，畸形率上升，同时精子存活率下降，提示 TBT 可影响哺乳动物精子质量。附睾酸性磷酸酶活性下降很可能与精子畸形率上升有一定关系。精子顶体酶以及乳酸脱氢酶同工酶-X 活性的显著降低，提示精子成熟受到影响，这些精子质量功能指标的变化情况与精液常规检测结果一致，进一步证实 TBT 具有精子毒性。MMP7 和 TD02 mRNA 表达量的显著下降，提示 TBT 可影响附睾内一些基因的表达，而这些基因很可能与附睾的功能或精子成熟有关。以上结果说明 TBT 具有附睾毒性以及精子毒性。TBT 引起的精子数量和质量下降能影响动物的生殖。本实验以青春期昆明雄鼠为研究对象，通过较低
14、浓度的氯化三丁基锡(Tributyltin chloride，TBTCl)(0.5，5，and50g/kg)灌胃实验，染毒 45 d后，观察 TBT 对生殖系统的毒性效应，探讨其对精子发生及精子成熟损伤的机理和途径。有关精子发生方面的检测指标包括睾丸的组织形态学，睾丸成熟情况、血清促性腺激素和睾丸性激素水平、睾丸细胞凋亡和细胞增殖情况，血清甲状腺激素(T3、T4)水平和睾丸甲状腺激素受体(TRs)表达量(mRNA 水平)；有关精子成熟方面的检测指标包括附睾组织形态，精液质量参数、附睾功能标志物活性(中性 -葡萄糖苷酶和附睾酸性磷酸酶)、精子功能指标以及附睾内特异性表达基因(MMP7 和 TD0
15、2)的表达量(mRNA 水平)。 1 TBT 对睾丸精子发生的影响。TBT 处理后雄性小鼠性体比指数没有显著变化，但睾丸组织结构发生明显改变，而且损伤程度随 TBT 剂量增加而加重，在 50g/kg 剂量组，生精细胞排列杂乱、无序，各级生精细胞间出现大量的间隙，大量生精细胞异常脱落进入生精小管管腔。和对照组比较，处理组睾丸睾酮水平呈现出 TBT 剂量依赖性显著升高，雌激素水平呈现剂量依赖性下降趋势，而血清黄体生成素水平以及卵泡刺激素水平较对照组有所下降。运用免疫组织化学和 western-blotting的方法对睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平进行研究，发现随着 TBT 浓度的增加，睾
16、丸内 PCNA 表达量有下降趋势，但与对照组相比较，没有显著性变化。运用 TUNEL 技术检测 TBT 染毒 45 d 对小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，发现各处理组凋亡阳性细胞数与对照组相比有所升高，但差异不显著。TBT 处理后小鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平以及三碘甲腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)比率呈现剂量依赖性显著下降，睾丸 TR mRNA 表达量下调。 2 TBT 对附睾功能以及精子成熟的影响。TBT 处理组小鼠精子密度、存活率和畸形率呈现剂量依赖性显著下降。组织形态学观察显示附睾头部未见明显变化，而体部和尾部可见不同程度的损伤，附睾损伤程度随着处理剂量的增加而逐渐加剧，呈现剂量依
17、赖效应：体部附睾管上皮细胞逐渐稀少，排列疏松，管间间隙变大，腔内精子减少，中浓度组和高浓度组附睾管腔内可见大量精子凝聚；附睾尾部上皮细胞排列疏松，管间间隙逐渐变大，管腔内精子减少，管间结缔组织逐渐减少。TBT处理使附睾上皮特异性分泌物中性 a-葡萄糖苷酶(NAG)活性有所下降，但与对照组相比，差异不显著；附睾酸性磷酸酶(ACP)活性随处理剂量的升高呈下降趋势，但与对照组相比无统计学差异。处理组精子顶体酶活性呈现剂量依赖性显著下降；精子乳酸脱氢酶同工酶-X 活性在高浓度组受到显著抑制。与对照组相比较，5 和 50g/kg TBT 浓度组 MMP7 mRNA 表达量显著下降，TD02 表达量呈现剂
18、量依赖性显著下降。 综上所述，本实验结果表明 TBT 能干扰青春期小鼠精子发生。组织学观察以及睾丸成熟度检查结果表明 TBT 能破坏睾丸组织的正常结构，抑制睾丸发育。TBT 处理能够显著诱导睾丸睾酮水平上升，17- 雌二醇水平下降，血清 LH 和 FSH 水平有所下降，造成生殖内分泌系统紊乱，进而干扰睾丸精子发生。TBT 处理显著降低血清 T3 含量，T3/T4 比率显著下降，TR 表达水平下调，说明 TBT 能干扰甲状腺正常生理机能，进而诱发睾丸生精机能障碍。另外，处理组凋亡细胞数目的增加以及 PCNA 蛋白表达量的降低，提示 TBT可在一定程度诱导睾丸生精细胞凋亡，抑制其增殖，这可能是 T
19、BT 抑制精子发生的潜在机制之一。TBT 干扰精子发生应该是多条途径共同作用的结果。 本实验结果还显示 TBT 能干扰青春期小鼠精子成熟。组织形态学观察结果表明TBT 对附睾组织结构造成损伤。精液常规检测结果显示处理组附睾精子密度下降，畸形率上升，同时精子存活率下降，提示 TBT 可影响哺乳动物精子质量。附睾酸性磷酸酶活性下降很可能与精子畸形率上升有一定关系。精子顶体酶以及乳酸脱氢酶同工酶-X 活性的显著降低，提示精子成熟受到影响，这些精子质量功能指标的变化情况与精液常规检测结果一致，进一步证实 TBT 具有精子毒性。MMP7 和 TD02 mRNA 表达量的显著下降，提示 TBT 可影响附睾
20、内一些基因的表达，而这些基因很可能与附睾的功能或精子成熟有关。以上结果说明 TBT 具有附睾毒性以及精子毒性。TBT 引起的精子数量和质量下降能影响动物的生殖。本实验以青春期昆明雄鼠为研究对象，通过较低浓度的氯化三丁基锡(Tributyltin chloride，TBTCl)(0.5，5，and50g/kg)灌胃实验，染毒 45 d后，观察 TBT 对生殖系统的毒性效应，探讨其对精子发生及精子成熟损伤的机理和途径。有关精子发生方面的检测指标包括睾丸的组织形态学，睾丸成熟情况、血清促性腺激素和睾丸性激素水平、睾丸细胞凋亡和细胞增殖情况，血清甲状腺激素(T3、T4)水平和睾丸甲状腺激素受体(TRs
21、)表达量(mRNA 水平)；有关精子成熟方面的检测指标包括附睾组织形态，精液质量参数、附睾功能标志物活性(中性 -葡萄糖苷酶和附睾酸性磷酸酶)、精子功能指标以及附睾内特异性表达基因(MMP7 和 TD02)的表达量(mRNA 水平)。 1 TBT 对睾丸精子发生的影响。TBT 处理后雄性小鼠性体比指数没有显著变化，但睾丸组织结构发生明显改变，而且损伤程度随 TBT 剂量增加而加重，在 50g/kg 剂量组，生精细胞排列杂乱、无序，各级生精细胞间出现大量的间隙，大量生精细胞异常脱落进入生精小管管腔。和对照组比较，处理组睾丸睾酮水平呈现出 TBT 剂量依赖性显著升高，雌激素水平呈现剂量依赖性下降趋
22、势，而血清黄体生成素水平以及卵泡刺激素水平较对照组有所下降。运用免疫组织化学和 western-blotting的方法对睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平进行研究，发现随着 TBT 浓度的增加，睾丸内 PCNA 表达量有下降趋势，但与对照组相比较，没有显著性变化。运用 TUNEL 技术检测 TBT 染毒 45 d 对小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，发现各处理组凋亡阳性细胞数与对照组相比有所升高，但差异不显著。TBT 处理后小鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平以及三碘甲腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)比率呈现剂量依赖性显著下降，睾丸 TR mRNA 表达量下调。 2 TBT 对附睾功能以及精子
23、成熟的影响。TBT 处理组小鼠精子密度、存活率和畸形率呈现剂量依赖性显著下降。组织形态学观察显示附睾头部未见明显变化，而体部和尾部可见不同程度的损伤，附睾损伤程度随着处理剂量的增加而逐渐加剧，呈现剂量依赖效应：体部附睾管上皮细胞逐渐稀少，排列疏松，管间间隙变大，腔内精子减少，中浓度组和高浓度组附睾管腔内可见大量精子凝聚；附睾尾部上皮细胞排列疏松，管间间隙逐渐变大，管腔内精子减少，管间结缔组织逐渐减少。TBT处理使附睾上皮特异性分泌物中性 a-葡萄糖苷酶(NAG)活性有所下降，但与对照组相比，差异不显著；附睾酸性磷酸酶(ACP)活性随处理剂量的升高呈下降趋势，但与对照组相比无统计学差异。处理组精
24、子顶体酶活性呈现剂量依赖性显著下降；精子乳酸脱氢酶同工酶-X 活性在高浓度组受到显著抑制。与对照组相比较，5 和 50g/kg TBT 浓度组 MMP7 mRNA 表达量显著下降，TD02 表达量呈现剂量依赖性显著下降。 综上所述，本实验结果表明 TBT 能干扰青春期小鼠精子发生。组织学观察以及睾丸成熟度检查结果表明 TBT 能破坏睾丸组织的正常结构，抑制睾丸发育。TBT 处理能够显著诱导睾丸睾酮水平上升，17- 雌二醇水平下降，血清 LH 和 FSH 水平有所下降，造成生殖内分泌系统紊乱，进而干扰睾丸精子发生。TBT 处理显著降低血清 T3 含量，T3/T4 比率显著下降，TR 表达水平下调
25、，说明 TBT 能干扰甲状腺正常生理机能，进而诱发睾丸生精机能障碍。另外，处理组凋亡细胞数目的增加以及 PCNA 蛋白表达量的降低，提示 TBT可在一定程度诱导睾丸生精细胞凋亡，抑制其增殖，这可能是 TBT 抑制精子发生的潜在机制之一。TBT 干扰精子发生应该是多条途径共同作用的结果。 本实验结果还显示 TBT 能干扰青春期小鼠精子成熟。组织形态学观察结果表明TBT 对附睾组织结构造成损伤。精液常规检测结果显示处理组附睾精子密度下降，畸形率上升，同时精子存活率下降，提示 TBT 可影响哺乳动物精子质量。附睾酸性磷酸酶活性下降很可能与精子畸形率上升有一定关系。精子顶体酶以及乳酸脱氢酶同工酶-X
26、活性的显著降低，提示精子成熟受到影响，这些精子质量功能指标的变化情况与精液常规检测结果一致，进一步证实 TBT 具有精子毒性。MMP7 和 TD02 mRNA 表达量的显著下降，提示 TBT 可影响附睾内一些基因的表达，而这些基因很可能与附睾的功能或精子成熟有关。以上结果说明 TBT 具有附睾毒性以及精子毒性。TBT 引起的精子数量和质量下降能影响动物的生殖。本实验以青春期昆明雄鼠为研究对象，通过较低浓度的氯化三丁基锡(Tributyltin chloride，TBTCl)(0.5，5，and50g/kg)灌胃实验，染毒 45 d后，观察 TBT 对生殖系统的毒性效应，探讨其对精子发生及精子成
27、熟损伤的机理和途径。有关精子发生方面的检测指标包括睾丸的组织形态学，睾丸成熟情况、血清促性腺激素和睾丸性激素水平、睾丸细胞凋亡和细胞增殖情况，血清甲状腺激素(T3、T4)水平和睾丸甲状腺激素受体(TRs)表达量(mRNA 水平)；有关精子成熟方面的检测指标包括附睾组织形态，精液质量参数、附睾功能标志物活性(中性 -葡萄糖苷酶和附睾酸性磷酸酶)、精子功能指标以及附睾内特异性表达基因(MMP7 和 TD02)的表达量(mRNA 水平)。 1 TBT 对睾丸精子发生的影响。TBT 处理后雄性小鼠性体比指数没有显著变化，但睾丸组织结构发生明显改变，而且损伤程度随 TBT 剂量增加而加重，在 50g/k
28、g 剂量组，生精细胞排列杂乱、无序，各级生精细胞间出现大量的间隙，大量生精细胞异常脱落进入生精小管管腔。和对照组比较，处理组睾丸睾酮水平呈现出 TBT 剂量依赖性显著升高，雌激素水平呈现剂量依赖性下降趋势，而血清黄体生成素水平以及卵泡刺激素水平较对照组有所下降。运用免疫组织化学和 western-blotting的方法对睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平进行研究，发现随着 TBT 浓度的增加，睾丸内 PCNA 表达量有下降趋势，但与对照组相比较，没有显著性变化。运用 TUNEL 技术检测 TBT 染毒 45 d 对小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，发现各处理组凋亡阳性细胞数与对照组相比有所升高
29、，但差异不显著。TBT 处理后小鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平以及三碘甲腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)比率呈现剂量依赖性显著下降，睾丸 TR mRNA 表达量下调。 2 TBT 对附睾功能以及精子成熟的影响。TBT 处理组小鼠精子密度、存活率和畸形率呈现剂量依赖性显著下降。组织形态学观察显示附睾头部未见明显变化，而体部和尾部可见不同程度的损伤，附睾损伤程度随着处理剂量的增加而逐渐加剧，呈现剂量依赖效应：体部附睾管上皮细胞逐渐稀少，排列疏松，管间间隙变大，腔内精子减少，中浓度组和高浓度组附睾管腔内可见大量精子凝聚；附睾尾部上皮细胞排列疏松，管间间隙逐渐变大，管腔内精子减少，管间结缔组织逐渐
30、减少。TBT处理使附睾上皮特异性分泌物中性 a-葡萄糖苷酶(NAG)活性有所下降，但与对照组相比，差异不显著；附睾酸性磷酸酶(ACP)活性随处理剂量的升高呈下降趋势，但与对照组相比无统计学差异。处理组精子顶体酶活性呈现剂量依赖性显著下降；精子乳酸脱氢酶同工酶-X 活性在高浓度组受到显著抑制。与对照组相比较，5 和 50g/kg TBT 浓度组 MMP7 mRNA 表达量显著下降，TD02 表达量呈现剂量依赖性显著下降。 综上所述，本实验结果表明 TBT 能干扰青春期小鼠精子发生。组织学观察以及睾丸成熟度检查结果表明 TBT 能破坏睾丸组织的正常结构，抑制睾丸发育。TBT 处理能够显著诱导睾丸睾
31、酮水平上升，17- 雌二醇水平下降，血清 LH 和 FSH 水平有所下降，造成生殖内分泌系统紊乱，进而干扰睾丸精子发生。TBT 处理显著降低血清 T3 含量，T3/T4 比率显著下降，TR 表达水平下调，说明 TBT 能干扰甲状腺正常生理机能，进而诱发睾丸生精机能障碍。另外，处理组凋亡细胞数目的增加以及 PCNA 蛋白表达量的降低，提示 TBT可在一定程度诱导睾丸生精细胞凋亡，抑制其增殖，这可能是 TBT 抑制精子发生的潜在机制之一。TBT 干扰精子发生应该是多条途径共同作用的结果。 本实验结果还显示 TBT 能干扰青春期小鼠精子成熟。组织形态学观察结果表明TBT 对附睾组织结构造成损伤。精液
32、常规检测结果显示处理组附睾精子密度下降，畸形率上升，同时精子存活率下降，提示 TBT 可影响哺乳动物精子质量。附睾酸性磷酸酶活性下降很可能与精子畸形率上升有一定关系。精子顶体酶以及乳酸脱氢酶同工酶-X 活性的显著降低，提示精子成熟受到影响，这些精子质量功能指标的变化情况与精液常规检测结果一致，进一步证实 TBT 具有精子毒性。MMP7 和 TD02 mRNA 表达量的显著下降，提示 TBT 可影响附睾内一些基因的表达，而这些基因很可能与附睾的功能或精子成熟有关。以上结果说明 TBT 具有附睾毒性以及精子毒性。TBT 引起的精子数量和质量下降能影响动物的生殖。本实验以青春期昆明雄鼠为研究对象，通
33、过较低浓度的氯化三丁基锡(Tributyltin chloride，TBTCl)(0.5，5，and50g/kg)灌胃实验，染毒 45 d后，观察 TBT 对生殖系统的毒性效应，探讨其对精子发生及精子成熟损伤的机理和途径。有关精子发生方面的检测指标包括睾丸的组织形态学，睾丸成熟情况、血清促性腺激素和睾丸性激素水平、睾丸细胞凋亡和细胞增殖情况，血清甲状腺激素(T3、T4)水平和睾丸甲状腺激素受体(TRs)表达量(mRNA 水平)；有关精子成熟方面的检测指标包括附睾组织形态，精液质量参数、附睾功能标志物活性(中性 -葡萄糖苷酶和附睾酸性磷酸酶)、精子功能指标以及附睾内特异性表达基因(MMP7 和
34、TD02)的表达量(mRNA 水平)。 1 TBT 对睾丸精子发生的影响。TBT 处理后雄性小鼠性体比指数没有显著变化，但睾丸组织结构发生明显改变，而且损伤程度随 TBT 剂量增加而加重，在 50g/kg 剂量组，生精细胞排列杂乱、无序，各级生精细胞间出现大量的间隙，大量生精细胞异常脱落进入生精小管管腔。和对照组比较，处理组睾丸睾酮水平呈现出 TBT 剂量依赖性显著升高，雌激素水平呈现剂量依赖性下降趋势，而血清黄体生成素水平以及卵泡刺激素水平较对照组有所下降。运用免疫组织化学和 western-blotting的方法对睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平进行研究，发现随着 TBT 浓度的增
35、加，睾丸内 PCNA 表达量有下降趋势，但与对照组相比较，没有显著性变化。运用 TUNEL 技术检测 TBT 染毒 45 d 对小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，发现各处理组凋亡阳性细胞数与对照组相比有所升高，但差异不显著。TBT 处理后小鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平以及三碘甲腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)比率呈现剂量依赖性显著下降，睾丸 TR mRNA 表达量下调。 2 TBT 对附睾功能以及精子成熟的影响。TBT 处理组小鼠精子密度、存活率和畸形率呈现剂量依赖性显著下降。组织形态学观察显示附睾头部未见明显变化，而体部和尾部可见不同程度的损伤，附睾损伤程度随着处理剂量的增加而逐渐加剧，呈现
36、剂量依赖效应：体部附睾管上皮细胞逐渐稀少，排列疏松，管间间隙变大，腔内精子减少，中浓度组和高浓度组附睾管腔内可见大量精子凝聚；附睾尾部上皮细胞排列疏松，管间间隙逐渐变大，管腔内精子减少，管间结缔组织逐渐减少。TBT处理使附睾上皮特异性分泌物中性 a-葡萄糖苷酶(NAG)活性有所下降，但与对照组相比，差异不显著；附睾酸性磷酸酶(ACP)活性随处理剂量的升高呈下降趋势，但与对照组相比无统计学差异。处理组精子顶体酶活性呈现剂量依赖性显著下降；精子乳酸脱氢酶同工酶-X 活性在高浓度组受到显著抑制。与对照组相比较，5 和 50g/kg TBT 浓度组 MMP7 mRNA 表达量显著下降，TD02 表达量
37、呈现剂量依赖性显著下降。 综上所述，本实验结果表明 TBT 能干扰青春期小鼠精子发生。组织学观察以及睾丸成熟度检查结果表明 TBT 能破坏睾丸组织的正常结构，抑制睾丸发育。TBT 处理能够显著诱导睾丸睾酮水平上升，17- 雌二醇水平下降，血清 LH 和 FSH 水平有所下降，造成生殖内分泌系统紊乱，进而干扰睾丸精子发生。TBT 处理显著降低血清 T3 含量，T3/T4 比率显著下降，TR 表达水平下调，说明 TBT 能干扰甲状腺正常生理机能，进而诱发睾丸生精机能障碍。另外，处理组凋亡细胞数目的增加以及 PCNA 蛋白表达量的降低，提示 TBT可在一定程度诱导睾丸生精细胞凋亡，抑制其增殖，这可能
38、是 TBT 抑制精子发生的潜在机制之一。TBT 干扰精子发生应该是多条途径共同作用的结果。 本实验结果还显示 TBT 能干扰青春期小鼠精子成熟。组织形态学观察结果表明TBT 对附睾组织结构造成损伤。精液常规检测结果显示处理组附睾精子密度下降，畸形率上升，同时精子存活率下降，提示 TBT 可影响哺乳动物精子质量。附睾酸性磷酸酶活性下降很可能与精子畸形率上升有一定关系。精子顶体酶以及乳酸脱氢酶同工酶-X 活性的显著降低，提示精子成熟受到影响，这些精子质量功能指标的变化情况与精液常规检测结果一致，进一步证实 TBT 具有精子毒性。MMP7 和 TD02 mRNA 表达量的显著下降，提示 TBT 可影
39、响附睾内一些基因的表达，而这些基因很可能与附睾的功能或精子成熟有关。以上结果说明 TBT 具有附睾毒性以及精子毒性。TBT 引起的精子数量和质量下降能影响动物的生殖。本实验以青春期昆明雄鼠为研究对象，通过较低浓度的氯化三丁基锡(Tributyltin chloride，TBTCl)(0.5，5，and50g/kg)灌胃实验，染毒 45 d后，观察 TBT 对生殖系统的毒性效应，探讨其对精子发生及精子成熟损伤的机理和途径。有关精子发生方面的检测指标包括睾丸的组织形态学，睾丸成熟情况、血清促性腺激素和睾丸性激素水平、睾丸细胞凋亡和细胞增殖情况，血清甲状腺激素(T3、T4)水平和睾丸甲状腺激素受体(
40、TRs)表达量(mRNA 水平)；有关精子成熟方面的检测指标包括附睾组织形态，精液质量参数、附睾功能标志物活性(中性 -葡萄糖苷酶和附睾酸性磷酸酶)、精子功能指标以及附睾内特异性表达基因(MMP7 和 TD02)的表达量(mRNA 水平)。 1 TBT 对睾丸精子发生的影响。TBT 处理后雄性小鼠性体比指数没有显著变化，但睾丸组织结构发生明显改变，而且损伤程度随 TBT 剂量增加而加重，在 50g/kg 剂量组，生精细胞排列杂乱、无序，各级生精细胞间出现大量的间隙，大量生精细胞异常脱落进入生精小管管腔。和对照组比较，处理组睾丸睾酮水平呈现出 TBT 剂量依赖性显著升高，雌激素水平呈现剂量依赖性
41、下降趋势，而血清黄体生成素水平以及卵泡刺激素水平较对照组有所下降。运用免疫组织化学和 western-blotting的方法对睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平进行研究，发现随着 TBT 浓度的增加，睾丸内 PCNA 表达量有下降趋势，但与对照组相比较，没有显著性变化。运用 TUNEL 技术检测 TBT 染毒 45 d 对小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，发现各处理组凋亡阳性细胞数与对照组相比有所升高，但差异不显著。TBT 处理后小鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平以及三碘甲腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)比率呈现剂量依赖性显著下降，睾丸 TR mRNA 表达量下调。 2 TBT 对附睾功能以
42、及精子成熟的影响。TBT 处理组小鼠精子密度、存活率和畸形率呈现剂量依赖性显著下降。组织形态学观察显示附睾头部未见明显变化，而体部和尾部可见不同程度的损伤，附睾损伤程度随着处理剂量的增加而逐渐加剧，呈现剂量依赖效应：体部附睾管上皮细胞逐渐稀少，排列疏松，管间间隙变大，腔内精子减少，中浓度组和高浓度组附睾管腔内可见大量精子凝聚；附睾尾部上皮细胞排列疏松，管间间隙逐渐变大，管腔内精子减少，管间结缔组织逐渐减少。TBT处理使附睾上皮特异性分泌物中性 a-葡萄糖苷酶(NAG)活性有所下降，但与对照组相比，差异不显著；附睾酸性磷酸酶(ACP)活性随处理剂量的升高呈下降趋势，但与对照组相比无统计学差异。处
43、理组精子顶体酶活性呈现剂量依赖性显著下降；精子乳酸脱氢酶同工酶-X 活性在高浓度组受到显著抑制。与对照组相比较，5 和 50g/kg TBT 浓度组 MMP7 mRNA 表达量显著下降，TD02 表达量呈现剂量依赖性显著下降。 综上所述，本实验结果表明 TBT 能干扰青春期小鼠精子发生。组织学观察以及睾丸成熟度检查结果表明 TBT 能破坏睾丸组织的正常结构，抑制睾丸发育。TBT 处理能够显著诱导睾丸睾酮水平上升，17- 雌二醇水平下降，血清 LH 和 FSH 水平有所下降，造成生殖内分泌系统紊乱，进而干扰睾丸精子发生。TBT 处理显著降低血清 T3 含量，T3/T4 比率显著下降，TR 表达水
44、平下调，说明 TBT 能干扰甲状腺正常生理机能，进而诱发睾丸生精机能障碍。另外，处理组凋亡细胞数目的增加以及 PCNA 蛋白表达量的降低，提示 TBT可在一定程度诱导睾丸生精细胞凋亡，抑制其增殖，这可能是 TBT 抑制精子发生的潜在机制之一。TBT 干扰精子发生应该是多条途径共同作用的结果。 本实验结果还显示 TBT 能干扰青春期小鼠精子成熟。组织形态学观察结果表明TBT 对附睾组织结构造成损伤。精液常规检测结果显示处理组附睾精子密度下降，畸形率上升，同时精子存活率下降，提示 TBT 可影响哺乳动物精子质量。附睾酸性磷酸酶活性下降很可能与精子畸形率上升有一定关系。精子顶体酶以及乳酸脱氢酶同工酶
45、-X 活性的显著降低，提示精子成熟受到影响，这些精子质量功能指标的变化情况与精液常规检测结果一致，进一步证实 TBT 具有精子毒性。MMP7 和 TD02 mRNA 表达量的显著下降，提示 TBT 可影响附睾内一些基因的表达，而这些基因很可能与附睾的功能或精子成熟有关。以上结果说明 TBT 具有附睾毒性以及精子毒性。TBT 引起的精子数量和质量下降能影响动物的生殖。本实验以青春期昆明雄鼠为研究对象，通过较低浓度的氯化三丁基锡(Tributyltin chloride，TBTCl)(0.5，5，and50g/kg)灌胃实验，染毒 45 d后，观察 TBT 对生殖系统的毒性效应，探讨其对精子发生及
46、精子成熟损伤的机理和途径。有关精子发生方面的检测指标包括睾丸的组织形态学，睾丸成熟情况、血清促性腺激素和睾丸性激素水平、睾丸细胞凋亡和细胞增殖情况，血清甲状腺激素(T3、T4)水平和睾丸甲状腺激素受体(TRs)表达量(mRNA 水平)；有关精子成熟方面的检测指标包括附睾组织形态，精液质量参数、附睾功能标志物活性(中性 -葡萄糖苷酶和附睾酸性磷酸酶)、精子功能指标以及附睾内特异性表达基因(MMP7 和 TD02)的表达量(mRNA 水平)。 1 TBT 对睾丸精子发生的影响。TBT 处理后雄性小鼠性体比指数没有显著变化，但睾丸组织结构发生明显改变，而且损伤程度随 TBT 剂量增加而加重，在 50
47、g/kg 剂量组，生精细胞排列杂乱、无序，各级生精细胞间出现大量的间隙，大量生精细胞异常脱落进入生精小管管腔。和对照组比较，处理组睾丸睾酮水平呈现出 TBT 剂量依赖性显著升高，雌激素水平呈现剂量依赖性下降趋势，而血清黄体生成素水平以及卵泡刺激素水平较对照组有所下降。运用免疫组织化学和 western-blotting的方法对睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平进行研究，发现随着 TBT 浓度的增加，睾丸内 PCNA 表达量有下降趋势，但与对照组相比较，没有显著性变化。运用 TUNEL 技术检测 TBT 染毒 45 d 对小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响，发现各处理组凋亡阳性细胞数与对照组相比有
48、所升高，但差异不显著。TBT 处理后小鼠血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平以及三碘甲腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)比率呈现剂量依赖性显著下降，睾丸 TR mRNA 表达量下调。 2 TBT 对附睾功能以及精子成熟的影响。TBT 处理组小鼠精子密度、存活率和畸形率呈现剂量依赖性显著下降。组织形态学观察显示附睾头部未见明显变化，而体部和尾部可见不同程度的损伤，附睾损伤程度随着处理剂量的增加而逐渐加剧，呈现剂量依赖效应：体部附睾管上皮细胞逐渐稀少，排列疏松，管间间隙变大，腔内精子减少，中浓度组和高浓度组附睾管腔内可见大量精子凝聚；附睾尾部上皮细胞排列疏松，管间间隙逐渐变大，管腔内精子减少，管间结缔组
49、织逐渐减少。TBT处理使附睾上皮特异性分泌物中性 a-葡萄糖苷酶(NAG)活性有所下降，但与对照组相比，差异不显著；附睾酸性磷酸酶(ACP)活性随处理剂量的升高呈下降趋势，但与对照组相比无统计学差异。处理组精子顶体酶活性呈现剂量依赖性显著下降；精子乳酸脱氢酶同工酶-X 活性在高浓度组受到显著抑制。与对照组相比较，5 和 50g/kg TBT 浓度组 MMP7 mRNA 表达量显著下降，TD02 表达量呈现剂量依赖性显著下降。 综上所述，本实验结果表明 TBT 能干扰青春期小鼠精子发生。组织学观察以及睾丸成熟度检查结果表明 TBT 能破坏睾丸组织的正常结构，抑制睾丸发育。TBT 处理能够显著诱导睾丸睾酮水平上升，17- 雌二醇水平下降，血清 LH 和 FSH 水平有所下降，造成生殖内分泌系统紊乱，进而干扰睾丸精子发生。TBT 处理显著降低血清 T3 含量，T3/T4 比率显著下降，TR 表达水平下调，说明 TBT 能干扰甲状腺正常生理机能，进而诱发睾丸生精机能障碍。另外，处理组凋亡细胞数目的增加以及 PCNA 蛋白表达量的降低，提示 TBT可在一定程度诱导睾丸生精细胞凋亡，抑制其增殖，这可能是 TBT 抑制精
