1、7.5%NaHCO3溶液NaHCO3 3.75g双蒸水 50ml过滤灭菌。双抗溶液的配制:取青霉素 100 万单位,链霉素 100 万微克(1 克=100 万微克=100 万单位)用无菌双蒸水配成 100ml。混合分装于 3 寸试管内。每支 1ml 置低温冰箱保存。使用时每 100ml 溶液加入1ml。有效期三个月。0.02%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)溶液配制:(VerSene 液)乙二胺四乙酸二钠 0.20g 0.1g 0.04g NaCl 8.0g 4.0g 1.6gKCl 0.20g 0.1g 0.04gNa2HPO4(Na2HPO412H2O) 1.15g(2.90) 0.58g(1
2、.45) 0.23g(0.58)KH2PO4 0.20g 0.10g 0.04g葡萄糖 0.20g 0.10g 0.04g双蒸水 1000ml 500ml 200ml溶解后,分装入瓶,10 磅 15 分钟灭菌。放 4备用MEM 培养液的配制:精确称取日本产 MEM 粉(EagleMEM“ Nissui ”)9.4 克 溶于 1000ml 双蒸水中分装入瓶中10 磅 15 分钟高压灭菌。Hanks液配制法:母液甲(20)配制:1NaCl 40.0gKCl 2.0gMgSO4.7H2O 0.5gMgCl2.6H2O 0.5g双蒸水 200ml2CaCl 2 (CaCl2 .2H2O) 0.7g双蒸
3、水 25 ml12分别溶解后混合,加双蒸水至 250ml,并加入 0.5ml 氯仿防腐,4保存。母液乙(20)配制:1Na 2HPO412H2O(Na 2HPO4) 0.76g(0.3014)KH2PO4 0.3g葡萄糖 5.0g双蒸水 200ml20.4%酚红 25ml12两液混合,加双蒸水至 250ml,并加入 0.5ml 氯仿防腐,4保存。Hanks应用液的配制:取母液甲 50ml母液乙 50ml双蒸水 900ml115,10 磅灭菌 15 分钟置室温或 4可使用一个月,临用时用 5.6% NaHCO3调 PH 至 7.27.4谷氨酰胺的配制:L谷氨酰胺 2.93g(3g)溶于灭菌双蒸水
4、中,使成 100ml,除菌过滤,保存于20 。枸橼酸钠抗凝剂的配制1、3.8%枸橼酸钠抗凝剂:枸橼酸钠 3.8g去离子水 100ml10 磅 20 分钟高压灭菌,放冰箱保存。动物采血用 4 份血液+1 份抗凝剂。1.5%豚鼠血球的配制豚鼠血球经 PBS(PH7.2-7.4) /生理盐水,洗涤 3 次后,取压积红细胞 1.5ml 加入100mlPBS(PH7.2-7.4)/生理盐水中,现配现用三抗溶液配制提前一天取 300ml 去离子水灭菌备用取 5 瓶青霉素(80 万 u/瓶)加 4 瓶链霉素(100 万 u/瓶)溶解于 300ml 去离子水中,再加入 50 瓶庆大霉素溶液,5ml/管分装后冻存,可保存三个月。