1、饮用水有限公司制造部质量文件微生物大样检测作业指导书编写批准文件编号版本号页码生效日期1 .目的：对一定数量可能含菌但含菌数较少、检出率较低的透明状液体样品进行定性检 测，以判断其是否带菌。2 .适用范围：适用于HOD工厂的成品水、空桶和聪明盖中微生物状况的评估。本文件取代目 前工厂现有关于大样检测的作业指导书。3 .具体内容：3.1 培养基的制备：抗臭氧型细菌大样检测液体培养基、抗臭氧型真菌大样检测液体 培养基（广东环凯），大样培养基必须制备为双倍料培养基（双倍料是除蒸储水外， 其余成分加倍）。按标签说明制备培养基，分装 50mL于150/250mL的三角瓶中, 在121c高压条件下灭菌15
2、分钟，待用。3.2 空桶大样检测操作：3.2.1 桶的取样3.2.1.1 在灌装间，取冲洗消毒后灌装前的桶，迅速用已消毒的聪明盖人工封盖后标 明工位编号带回化验室待检。3.2.1.2 取样要求，a、取样前须对取样人的手喷洒精消毒，保证无菌操作b 、封口所用盖须保证无菌。3.2.2 桶的检测3.2.2.1 每个桶中加入 150ml 无菌水，手持空桶尽量平放，边旋转边摇动，使无菌水充分涤洗空桶内壁。整个涮洗大于 20 秒，使无菌水充分涤洗空桶内壁。3.2.2.2 把空桶中水样，分别注入50ml 已制备好的细菌和霉菌液体培养基中，摇匀待培养。3.2.2.3 用 50mL 的无菌水代替样品作为空白对照
3、样品3.3 盖的大样检测操作3.3.1 盖的取样：将500ml 取样瓶，瓶口用牛皮纸包扎，在121 下蒸汽灭菌 15 分钟。在落盖槽出口，用无菌镊子取两个盖，置灭菌的烧杯中，然后用纱布及牛皮纸封口。其中，烧杯可用其他无菌取样容器替代。3.3.2 盖的检测： 在烧杯中加入150ml 无菌水， 使聪明盖内外与无菌水充分接触， 振荡均匀 2 分钟，制成样品。分别倒入（用无菌移液管取） 50ml 上述样品置于已制备好的细菌和霉菌液体培养基中，摇匀。3.4 成品水大样检测操作：倒入 （用无菌移液管取） 50ml 成品水于已制备好的细菌和霉菌液体培养基中， 摇匀。用 50mL 的无菌水代替样品作为空白对照样品。3.5 培养：检测细菌，置于 3537 下培养 24 小时后观察；检测霉菌，置2832 下培养 48小时后观察。检测细菌时，如与空白对照比较出现混浊，则表明样品中存在细菌，越混浊，表明细 菌数量越多；检测霉菌时，如出现团状絮状物，则表明样品中存在霉菌，絮状物越多, 表明霉菌数量越多。
