1、生物药剂学实验实验讲义制药与生命科学学院药物制剂专业编者：王永禄2007 年 6 月1目录实验一 阿司匹林片溶出速度的测定 .2实验二 扑热息痛药物动力学参数测定 .3实验三 中药当归的体内分布研究 .42实验一 阿司匹林片溶出速度的测定实验目的 学习片剂溶出速率测定的方法，掌握片剂溶出速率仪的使用和数据处理方法。实验方法1标准曲线的绘制：取 10ml 容量瓶(或刻度试管)6 只，依次加入阿司匹林标准掖(50mg100ml)0.1 ml、0.2 ml、0.4 ml、0.6 ml、O.8 ml、1.0ml，人工胃液 0.9ml、O.8 ml、0.6 ml、0.2 ml、0.0 ml，各加蒸馏水
2、5 ml，用0.1mol/L 的 Na0H 溶液调节至 9-10。置 10水浴中 5 分钟，冷至室温，用0.1mol/L HCl 酸化至 Ph 值 3-5，各加 5硝酸铁镕液 5 滴，加水至 10ml。用72 型分光光度计，以 l ml 人工胃浓加 9ml 蒸馏水作参比，测出各管溶液在波长 540nm 处的吸收度。2阿司匹林片的含量测定：取 10 片合格的阿司匹林片，研成细粉，精密称取相当于一片重量的细粉，悬浮于约 600ml 蒸馏水中，在 40-50水浴中不断搅拌溶解 15-20min，冷却，补足蒸馏水至 1000ml。摇匀，滤过。精密量取滤液 1ml(或 2ml)，于 lO ml 容量瓶或
3、带塞刻度管中，加水 5ml，用 0.1mol/L 的Na0H 溶液调节至 9-10。以下操作与标准曲线绘制的方法相同。然后根据阿司匹林的标准曲线求出阿司匹林片的含量。自精密量取滤液 1ml 起，同法重复测定两次，取平均值。3溶出速率的测定：取人工胃掖 1000ml，预热至 37，再置恒温水浴中继续维持 37，调节溶出速率测定仪，控制转速为 100rmin，当仪器开始运转时，精密称取待测片剂 6 片，分别放人转蓝并浸入人工胃液中，同时开始记录时间，按 5 min、10 min、15 min、20 min、30 min、40 min、50 min、60min 取样，每次取样 5ml，同时补足人工胃
4、液 5ml，过滤后取 1ml 进行含量测定。含量测定按含量测定项下方法，自“精密量取滤液 1ml(或 2ml)，于lO ml 容量瓶或带塞刻度管中”开始，以下操作相同。结果处理1由制备标准曲线各数据，求出回归方程并列表2根据回归方程计算各样品的浓度，同时按含量测定结果算出各时间的累积溶出百分数。并以时间与溶出百分数作图。3用威布尔概率纸拟合直线，求出 T50(溶出 50所需的时间)。3实验二 扑热息痛药物动力学参数测定实验目的 掌握用血药浓度法测定药物动力学参数的原理与方法，掌握颈动脉采血等基本试验操作技能，加深对所学参数的理解。实验方法1.动物准备：取体重 2kg 左右健康家兔，实验前禁食
5、12 小时。2.血液样品的采集事先准备 10 支离心试管洗净，并经 1肝素溶液处理烤干或阴干，标上试管号备用。取家免称重，试验前要取 1 份血样作空白对照用。精密称取 0.25g 扑热息痛于 25mI 容量瓶内。加灭菌注射用水适量，在 37 下溶解，并稀释至 25mI。静脉注射 10ml，(自采空白血的另一侧耳静脉注射)，立即记下开始时间，然后麻醉按 5ml/kg 腹腔注射乌拉坦（20%） 。采血方式采用颈动脉插管取血法进行。分别在灌胃给药后 30min、1h、1.5h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h 采血。3.血液样品的制备每次采 2ml 血液置 2ml 离心管中，离心 10min
6、（4000 转/分） 。精密吸取上清200l 液置 2ml 离心管中，加乙腈至 2ml，超生提取 10min。离心 10min（4000转/ 分） 。取上清液置冰箱保存备用。4.空白血制备给药前采用耳后缘静脉取血法取血。同法处理作为空白实验使用。实验结果 绘制血药浓度曲线，求算药动学参数。结论与讨论做好本实验的关键是什么，操作中应注意哪些问题?2如果所求结果不理想，可能的原因是什么?怎样改进?4实验三 中药当归的体内分布研究实验目的 掌握用药物体内分布试验的基本原理与方法，掌握组织匀浆等基本试验操作技能。实验方法1.实验动物：小白鼠，试验前禁食 12 小时。2.样品制备：取体重 202g 小白
7、鼠 24 只，禁食 12 小时，随机分成 12 组，分别为空白对照组，及灌胃后 30 分钟、1、2、3、4、6、8 小时不同时间段组，以0.2ml/10g 的剂量灌胃，分别按不同时间段眼球采血 0.25ml 于 2ml 的 Ep 管中，加乙腈至 2.0ml 刻度，超声提取 10 分钟，然后离心（10000rpm）10 分钟，取上清液作为供试品溶液。同时，处死小鼠，取心、肝脏 0.2g、脾、肺、及肾脏一个，精密称定，加乙腈适量，在匀浆机中匀浆，转移至 2.0ml 的 Ep 管中，加乙腈至 2.0ml 刻度，超声提取 10 分钟，然后离心 10 分钟，取上清液作为供试品溶液。另外，空白对照组灌等量的蒸馏水，其他步骤按实验组处理方法，作为空白对照液及回收实验用。实验结果 绘制脏器药物分布曲线，求算药动学参数。各脏器血药浓度时间分布表时间(min) 脏药物浓度(mg/g)脏药物浓度(mg/g)脏药物浓度(mg/g)脏药物浓度(mg/g)脏药物浓度(mg/g)1015203045601201805240结论与讨论 1. 药物组织匀浆操作中应注意的问题？2. 中药体内分布研究的意义？
