1、 分析溶液对菌斑的作用分析溶液对菌斑的作用【摘要】 目的 观察含 01%抗变形链球菌 IgY 抗体的溶液对变形链球菌及菌斑量的作用效果。方法 口腔医学论文采用双盲法,试验组 44 名小学三年级学生使用含 IgY 抗体的溶液 21 d,对照组 41 人使用安慰剂。试验前后对所有学生的菌斑指数、菌斑量、唾液和菌斑中的变形链球菌进行了检测。结果 试验组学生试验前的菌斑重量是(46 4312)mg,试验后的菌斑重量是(36 6256)mg,试验前后的差异有极显著性(P=0007),与试验前相比菌斑量减少了211%。对照组学生的菌斑重量在试验前后分别是(45 0238)mg 和(41 2259)mg,二
2、者差异无显著性(P=0286)。唾液和菌斑中的变形链球菌量没有显著变化。结论 含 01%抗变形链球菌IgY 抗体的溶液有减少菌斑形成的作用。【关键词】 链球菌 变异 牙菌斑 免疫球蛋白类龋病是一种感染性疾病,变形链球菌是其主要的致龋菌1。因此,许多学者致力于免疫防龋的研究,希望从致龋的病原体入手来达到预防龋齿的目的。免疫防龋包括致龋菌特异性抗原和特异性抗体的研究2 。近来 ,由于被动免疫在安全性和可行性方面好于主动免疫,被动免疫的研究受到了广泛的重视。抗变形链球菌 IgY 抗体是用变形链球菌免疫母鸡后产生的鸡蛋黄免疫球蛋白3。IgY 抗体可抑制变形链球菌葡糖基转移酶的活性,阻止变形链球菌黏附于
3、牙齿表面,减少牙菌斑的形成;而且 IgY 抗体本身所具有的趋化、调理、吞噬作用可清除致龋菌。我们从临床的角度,观察了含 01%抗变形链球菌IgY 抗体的溶液对唾液和菌斑中的变形链球菌以及菌斑量的作用效果。资料和方法 1.受试对象:小学三年级学生共 88 人,按班分组,其中试验组 46 人,对照组 42 人。试验组使用含 01% IgY 抗体的溶液(商品名:清齿露,喷雾剂型,武汉金鹏生物工程有限公司生产,主要成分:抗变形链球菌 IgY 抗体、蒸馏水、儿茶素、天然薄荷、阿巴斯甜及食用香精等),对照组使用安慰剂(武汉金鹏生物工程有限公司)。安慰剂中不含 IgY,其他成分相同。学生自愿参加,试验开始前
4、学生家长签署知情同意书。试验结束时有 85 人参加了临床检查,试验组和对照组的有效病例分别是 44 人和 41 人。2.使用方法:连续使用 4 周,周末除外,共 21 d。每天上、下午各 1 次,每次使用时由牙科护士或学校的卫生老师用含 01%IgY 抗体的溶液对受试者口腔内的各个象限喷涂 3 次,嘱学生含漱 1 min 咽下。安慰剂使用方法相同。3.临床检查:试验开始前和结束后各进行一次口腔检查,检查者 2 人,同一名受试者在试验前、后由相同的检查者进行检查。要求受试者在临床检查前一天早晨刷牙后放弃口腔卫生措施直至检查结束。临床检查第 1 天下午测定受试者唾液中和菌斑中的变形链球菌水平,检查
5、菌斑指数;第 2 天上午收集受试者的菌斑。4.观察指标:(1)菌斑量: 用银汞雕刻刀收集受试者全口牙齿光滑面的菌斑(48 h 的菌斑),放入微离心管中,带回实验室的第 2 天测定菌斑重量。(2)Quigley-Hein 菌斑指数:检查的指数牙是 6 1V1 6 。结果判定分为 6 个等级(0、 1、2、3、4、5) 。(3) 唾液中的变形链球菌水平: 用 Dentocult 的方法测定4, 这种方法用厂家生产的标准的试剂盒进行,由固定人员操作。试剂盒包括石蜡块、含 MSB 培养液的培养瓶、杆菌肽纸片、附着唾液和菌斑的标准塑胶板。受试者咀嚼石蜡块 1 min 后,用测唾液的塑胶板在其舌背上正反压
6、试 10 次,嘱受试者轻闭嘴唇,取出塑胶板,放入培养瓶中,37培养 48 h。结果判定按照厂家提供的评价图进行,分 0、1、2、3 共 4 个等级,记分越高,说明唾液中的变形链球菌水平越高。(4) 菌斑中的变形链球菌水平:用 Dentocult 的方法检测口内 4个部位的菌斑5,这 4 个部位是 、颊面、 V6 之间的邻面、V6之间的邻面。每一部位用一无菌棉签沾取菌斑后涂布在测菌斑的塑胶板上,将塑胶板放入培养瓶中,37培养 48 h。结果判定同唾液中变形链球菌的判定一样,也分为 4 个等级(0、1、2、3) 。5.盲法: 双盲法。本研究所用的 IgY 抗体溶液和安慰剂在外形上完全一致。检查者和
7、受试者不知道分组情况。试验全部结束后揭盲。6.统计学分析:SPSS 软件处理数据。试验组和对照组之间各项指标的比较用两独立样本的 t 检验进行;试验组和对照组自身在试验前后各项指标的比较用配对样本的 t 检验进行。结果 1.试验组和对照组之间菌斑量在试验前、后差异无显著性。试验组菌斑量在试验前后差异有极显著性(P=0007),而对照组菌斑量在试验前、后差异无显著性(P=0286) 。2.试验前后试验组和对照组之间菌斑指数的差异无显著性。试验组和对照组的菌斑指数在试验前后的差异均有有高度统计学意义(P=0001;P=0 000)。3.试验前后菌斑及唾液中的变链菌水平在试验组和对照组之间差异均无显
8、著性。自身比较时各组在试验前后差异亦无显著性(表 1)。讨论不论试验组还是对照组都要进行试验前后自身的比较,同一名受试者在试验前、后由同一位检查者操作,因此减少了两名检查者之间的差异对结果的影响。本试验结果表明,自身比较时试验组和对照组的菌斑指数在试验前后的差异均有高度显著性,即试验后菌斑指数下降。菌斑指数反映的是菌斑在牙面上附着的范围,并不能反映菌斑的厚度,单用菌斑指数表示菌斑量有一定局限性,而菌斑重量的测定是一个客观的指标。试验组学生试验前的菌斑均重是 464 mg,试验后菌斑均重是 366 mg,二者差异有极显著性,与试验前相比菌斑减少了 211%。对照组的菌斑重量在试验前后没有差异。从
9、试验结果未看出唾液和菌斑中变形链球菌量的变化,主要原因可能是 Dentocult 的方法仅是半定量而非完全定量的测定方法。如果延长试验时间或增加试验的样本量,用 Dentocult 的方法可能会观察到变形链球菌量的变化。Hatta 等6观察了使用 7 d 含0.1% IgY 的漱口液对成人唾液中和菌斑中的变形链球菌量的影响,我们观察的是变形链球菌在链球菌中所占的比例的变化,结果显示试验前后变形链球菌比例的变化差异无显著性,但菌斑中的变形链球菌比例在使用漱口液后有下降的趋势。本研究表明,含 0.1%抗变形链球菌IgY 抗体的溶液有减少菌斑形成的作用。而临床应用时是否能减少口腔内的变形链球菌水平尚
10、待进一步观察。iva. J Dent Res, 1989,68:468-471.5 Bratthall D, Hoszek A, Zhao X. Evaluation of a simplified method forsite-specific determination of mutans streptococci levels. Smunization against dentalplaque formation in humans: effect of a mouth rinse containing egg yolkantibodies (IgY) specific to streptococci mutans. CariesRes, 1997, 31:268-274.
