1、 肺癌患者肺组织中 COX?2 和 PGE2 表达的变化及其意义【摘要】 目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者肺组织中环氧合酶?2（COX?2）和前列腺素 E2(PGE2)表达的变化及其与临床病理参数之间的关系。 方法 采用逆转录聚合酶联反应（RT?PCR）和放射免疫法，分别检测 38 例 NSCLC 患者正常肺组织和肺癌组织中COX?2 mRNA 和 PGE2 表达的变化。结果 38 例肺癌患者正常肺组织和肺癌组织中分别有 34 例和 3 例检测到 COX?2 mRNA 表达，阳性表达率分别为 89.47%和 7.89%；半定量分析肺癌组织中的 COX?2 mRNA 平均吸光度显著高于正
2、常肺组织（P0.01）。肺癌组织和正常肺组织匀浆中 PGE2 浓度分别为（42.336.13）g/L 和（5.871.40）g/L，两者比较差异亦具有显著性（ P0.01）。直线相关分析发现肺癌组织中 COX?2 mRNA 的表达和 PGE2 浓度的变化呈正相关（r=0.552，P0.05）。COX?2 mRNA 表达在不同性别、年龄、组织分型、TNM 分期和分化程度之间差异均无显著性（P 均0.05）。结论 NSCLC 患者肺癌组织中 COX?2 mRNA 和 PGE2表达增强，可能在 NSCLC 的发生和发展中具有重要作用。 【关键词】 肺癌；环氧合酶；前列腺素 E2ABSTRACT：Ob
3、jective To explore the changes of cyclooxygenase 2(COX?2) and prostaglandin E2(PGE2) in lung tissue of non?small cell lung cancer(NSCLC) patients and their clinical significance.Methods By reverse-transcriptional polymerase chain reaction(RT?PCR) and radioimmunoassay, the changes of COX?2 mRNA and P
4、GE2 in carcinome tissue and normel lung tissue of 38 cases of NSCLC patients easured respectively.Results The positive percentage and averge absorbance of COX?2 mRNA expression in lung cancer tissue al tissue (P0.01).PGE2 in lung cancer tissue al tissue (P0.01).There RNA and PGE2(r=0.552，P0.05).The
5、expression of COX?2 mRNA had no relation to sex, age, histopathological type, TNM staging and differentiation degree(P0.05).ConclusionsThe expression of COX?2 mRNA and PGE2 is increased in lung cancer tissue of NSCLC patients, ay play an important role in carcinogenesis and development of lung cance
6、r.KEY 分期：a 期 4 例，b 期 5 例，a 期 7 例，b 期 8 例，a 期 6 例， b 期 5 例，期 3 例。所有患者均为首次发现并确诊，不伴有慢性阻塞性肺疾病、哮喘、肺间质纤维化以及其他感染性疾病，术前均未行放疗、化疗或生物免疫治疗。术中取肺癌组织和远离肿瘤的正常组织在 1h 内速冻后，置-80保存待测。1.2 肺组织中 COX?2 mRNA 表达的检测采用 TRIzol 一步法提取肺组织总 RNA。用 DNA/RNA 测定仪（英国 Pharmarcia 公司产品）检测 RNA 浓度和纯度。取 2g 总RNA，加入 Oligo(dt)15 引物及逆转录酶（均为美国 Prom
7、ega 产品）在 25g 体积下，37，60min 完成逆转录反应后，进行聚合酶链反应。COX?2 引物序列3 为：上游 5?TGAAAC CCACTCCAAACACA?3,下游 5?TGGAACAACTGCTCATCACC?3；?actin 引物序列为：上游 5?GATGGTGGGTATGGGTCAGAAGGA?3,下游 5?GCTCATTGCCGATAGTGATGACCT?3,均由上海生物工程公司合成。反应条件分别为：COX?2：94，30s；55，1min；72，2min；72，10min，35 个循环；?actin: 94，1min；56，1min；72，1min；72，7min，35
8、 个循环。COX?2、?actin 的扩增产物分别为 728bp 和 630bp。经 2%琼脂糖凝胶电泳，利用MUVB?20 凝胶分析系统（美国 Ultralum 公司）对扩增产物条带进行扫描，以 COX?2/?actin 的吸光度（A 值）作为 COX?2 mRNA 表达的相对含量。1.3 肺组织匀浆 PGE2 的测定每克肺组织加入 9ml 生理盐水，冰浴下匀浆 30s，4下3500r/min 离心 30min，取上清液置-30保存待测。采用放射免疫法检测 PGE2 浓度。操作步骤按试剂盒（北京东亚免疫技术研究所提供）说明书进行。1.4 统计学处理采用 SPSS10.0 软件包进行统计，计量资料数据采用 q 检验和直线相关分析，计数资料百分率比较采用卡方检验。P0.05 为差异有显著性。
