1、Trizol 法提取 RNA+蛋白1.取冻存组织加入 1ml Trizol（invitrogen）匀浆，样品量不可超过总体积的10%，室温孵育 5min，超声粉碎至组织完全溶于液体中；2.加入 0.2ml 氯仿，剧烈晃动 15s，室温孵育 2-3min，412000g 离心 15min；此时溶液分为水相和有机相。3.小心吸取并丢弃上层水相（ 该 水 相 中 富 含 细 胞 总 RNA，用于提取 RNA，进行PCR 实验） ；4.在剩下的中间层及有机相中加入 0.3ml 无水乙醇，颠倒充分混匀后室温放置2-3min，4下 2000g 离心 5min；5.小心吸取并收集上层有机相（沉淀为 DNA）
2、，转移到新的离心管中，加入1.5ml 异丙醇，轻轻混匀后室温放置 10min，4下 12000g 离心 10min；此时沉淀为蛋白。6.弃上清液，加 2ml 0.3M 盐酸胍（95%乙醇溶解）清洗沉淀 3 次，每次清洗过程中，先将沉淀保存于清洗液中 20min，然后在 4下 7500g 离心 5min。最后一次清洗后，丢弃上层液相，将沉淀悬浮于 2 ml 乙醇中，涡旋震荡 15s 后在室温下放置 20min，然后在 4下 7500g 离心 5min。7.丢 弃 上 层 液 相 ， 将 沉 淀 真 空 干 燥 5-10min。然后将沉淀溶解于 1% SDS（十二烷基硫酸钠）中。在 50水浴中反复吹打以助溶。不溶物在 4下 10000g 离心10 min 去 除 。 收 集 上 清 ， 转 移 到 新 的 收 集 管 中 。 该 上 清 中 的 蛋 白 样 品 可 直 接 用 于Western Blotting 实验或保存于-20 。常见问题：1. 得率低：样品裂解或匀浆处理不彻底；最后得到的蛋白质沉淀未完全溶解2. 蛋白质降解：组织取出后未马上冷冻3. 电泳时条带变形：蛋白质沉淀洗涤不充分
