1、苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-5 0 0 ml,HE-1 0 0 0 ml,HE-2 5 0 0 ml【包装规格】苏木素染色液5 0 0 ml、1 0 0 0 ml 2 5 0 0 ml；伊红染色液5 0 0 ml、1 0 0 0 ml2 5 0 0 ml；返蓝染色液5 0 0 ml、1 0 0 0 ml 2 5 0 0 ml。【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不
2、可替代的细胞核颜料。带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。此染色法可观察到清晰的细胞结构。样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。使用BioGnost返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他
3、返蓝染色液时发生降解。【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+1 5 C和+2 5 C之间。保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。产品使用效期为2年，具体效期见标签。【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。【检验方法】染色准备部分1 .固定样本（4 %甲醛溶液，1 0 %甲醛溶液），水洗去多余
4、的溶液，然后使用梯度浓度的乙醇溶液（7 0 %，8 0 %，9 5 %，1 0 0 %）进行脱水处理。2 .二甲苯或二甲苯替代物（BioClear New）对样本进行透明处理。3 .石蜡（BioWax 5 2 /5 4，BioWax Plus 5 6 /5 8，BioWax 5 6 /5 8，BioWax Blue）包埋样本。4 .将蜡块切成4 -6 m厚的切片，置于载玻片上。苏木素-伊红染色步骤（进行性染色）1二甲苯或二甲苯替代物（BioClear New）脱蜡处理3次，每次2 min2 1 0 0 %乙醇水化5和3 min，交替两次3 9 5 %乙醇水化2 min4蒸馏水水化2 min5苏
5、木素染色3 -5 min注意：为防止溶液沉淀和表面形成金属光泽漂浮物，使用前过滤处理。6水洗，直至不再有多余染液7 Scott溶液对细胞核进行返蓝处理1 min注意：在没有Scott溶液或其他返蓝处理的试剂情况下，可用自来水漂洗3 -5 min。8用伊红染色液继续染色1 5 s-2 min注意：在伊红染色不足1 5 s的情况下，染色效果不佳，胞核不清晰。建议染色时间9 0 s-2 min。9自来水冲洗2 min1 0 9 5 %乙醇脱水2组，每组上下1 0 -1 5次1 1 1 0 0 %乙醇脱水3组，每组上下1 0 -1 5次1 2二甲苯或二甲苯替代物（BioClear New）透明化处理2
6、次，每次2 min注意事项：1 .透明化处理后应立即用合适的封片剂进行封片，如果使用二甲苯透明化，对应使用二甲苯基质的封片剂（BioMount，BioMount High，BioMount M）；如果是由二甲苯替代物（BioClear New）透明化，使用BioMount New封片。2 .使用盖玻片覆盖。苏木素-伊红染色步骤（退行性染色）1二甲苯或二甲苯替代物（BioClear New）脱蜡处理3次，每次2 min2 1 0 0 %乙醇水化5和3 min，交替两次3 9 5 %乙醇水化2 min4蒸馏水水化2 min5苏木素染色4 -8 min注意：为防止溶液沉淀和表面形成金属光泽漂浮物，使
7、用前过滤处理.6水洗，直至不再有多余染液7盐酸乙醇分化3 -1 0次上下注意：该步骤可去除细胞核和细胞质中多余的苏木素染液。酸醇分化时间过长会引起细胞核褪色8自来水冲洗9 Scott溶液对细胞核进行返蓝处理1 min注意：在没有Scott溶液或其他返蓝处理的试剂情况下，可用自来水漂洗3 -5 min1 0用伊红对比染色液继续染色1 5 s-2 min注意：在伊红染色不足1 5 s的情况下，染色效果不佳，胞核不清晰。建议染色时间9 0 s-2 min1 1自来水冲洗2 min1 2 9 5 %乙醇脱水2组，每组上下1 0 -1 5次1 3 1 0 0 %乙醇脱水3组，每组上下1 0 -1 5次1
8、 4二甲苯或二甲苯替代物（BioClear New）透明化处理2次，每次2 min注意事项：1 .透明化处理后应立即用合适的封片剂进行封片，如果使用二甲苯透明化，对应使用二甲苯基质的封片剂（BioMount，BioMount High，BioMount M）；如果是由二甲苯替代物（BioClear New）透明化，使用BioMount New封片。2 .使用盖玻片。【阳性判断值或者参考区间】染色结果细胞核蓝色细胞质、胶原、肌纤维、红细胞粉红色【检验结果的解释】染色结果细胞核蓝色细胞质、胶原、肌纤维、红细胞粉红色【检验方法的局限性】暂无【产品性能指标】染色效果【注意事项】染色时间长短并非标准化、
9、固定化，需要根据临床和实验经验来调控；染色深浅度根据染色时间而定，实际操作需根据具体实验需求确定。【标识的解释】型号批号有效期至生产日期储存条件IVD产品CE标志生产商【参考文献】1 . Baker, J.R. (1 9 6 2 ): Experiments on the action of mordants. 2 . Aluminium-hematein.Q.J.Microsc. Sci. p1 0 3 4 9 3 -5 1 7 .2 . Conn, J. (1 9 7 7 ): Biological Stains, 9 th ed., Baltimore: Williams and Wil
10、kens Co.3 . Harris, H.F. (1 8 9 8 ): A new method of “ripening” haematoxylin. Microsc. Bull. (Philadelphia)Dec. 4 7 .4 . Harris, H.F. (1 9 0 0 ): On the rapid conversion of haematoxylin into haematein in stainingreactions. J. Appl. Microsc. p3 7 7 7 -7 8 0 .5 . Bruce-Gregorios, J.H. (1 9 7 4 ): Hist
11、opathologic Techniques, IMC Press Inc., Quezon City,Philippines.6 . Cook, D.J. (2 0 0 9 ): Cellular Pathology: An introduction to techniques and applications. 2 nded.,Scion Publishing Ltd., Bloxham.7 . Gurr, E. (1 9 7 1 ): Synthetic dyes in biology, medicine and chemistry. Academic Press, London.8 . Sheehan, D.C. et Hrapchak, B.B. (1 9 8 0 ): Theory and Practice of Histotechnology, 2 nd ed St.Louise: CV Mosby Co.【基本信息】售后服务单位名称：上海科汇生物技术有限公司联系方式：4 0 0 8 2 0 7 0 3 6代理人的名称：上海科汇生物技术有限公司住所：上海市闵行区新骏环路1 1 5号3幢B4 2 0室
