1、液质联用基础知识和名词术语（LC/MS/MS）,2019-08-01,什么是液质联用？,LC-MS/MS：是一种将液相色谱的高效分离能力与质谱的特异、灵敏、多组分检测能力相结合，实现复杂混合物更准确的定量和定性分析技术。在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛的应用。,液相色谱,样品引入,离子化,质量分析器,检测器,数据分析,质谱图,什么是质谱分析法,质谱分析法是先将中性分子离子化，变为气态离子混合物，并按质荷比（ m/z）分离、丰度记录的一种分析方法; 质谱仪是实现上述分离分析技术，从而测定物质的质量与含量及其结构的仪器。由样品导入系统、离子源、检测器、数据处理系统组成。 质谱分析
2、法是一种快速,有效的分析方法，利用质谱仪可进行同位素分析,化合物分析，气体成分分析以及金属和非金属固体样品的超纯痕量分析。,什么是质谱(MS) mass spectrometry,质谱图：不同质荷比的离子经质量分析器分离，然后被检测并记录下来的谱图叫做质谱图，简称质谱。 质谱图的横坐标是质荷比（m/z），纵坐标是离子强度。,原子量：一种元素的所有同位素的重量平均值 1H(氕，H)，2H(氘，D)，3H(氚，T) 同位素：具有相同原子序数而又具有不同的质量数的原子叫做同位素 同位素丰度：自然界中某同位素原子所占的百分数叫做该元素的相对丰度 质量数=质子+中子 原子序数=质子数,质荷比：离子的质量
3、与它所带电荷的比值（m/z） 质荷比是质谱图的横坐标，是质谱定性的基础。 基峰：在谱图中，指定质荷比范围内强度最大的离子峰叫做基峰。基峰的相对丰度为100% 丰度：主要用于描述离子响应强度，即在某一质谱图中以离子响应强度最大的峰为基峰，以它的强度为100%，其他离子峰强与之的比例为相对丰度,总离子流图（Total ions current, TIC）:在选定质量范围内，所有离子强度的总和对时间或扫描次数所做的图。液质联用是TIC即色谱图 质量色谱图（Mass chromatogram ）叫提取离子色谱图（extract ion Chromatography，XIC）：制定某一质荷比的离子强度对
4、时间扫描号所作的图，是质谱法处理数据的一种方式。,质谱中采用的质量单位,Da=Dalton(道尔顿) 质量单位，等于一个碳原子（12C）质量的十二分之一，约1.6610-24克；一克约为61023道尔顿 amu=atomic mass unit原子质量单位1amu=1Da,仪器的使用范围,仪器的测试条件决定了其使用范围 色谱条件（液相色谱条件） 质谱条件（离子源的选择）,HPLC条件的选择,根据化合物的类型选择选择流动相的组成；（甲醇-水、乙腈-水或甲醇-乙腈-水 DMF DMSO THF） 某些化合物质有某种流动相体系才可以出峰 一般正离子方式用甲醇，负离子方式用乙腈 梯度的设定：梯度变化太
5、快时对离子化效率影响很大，相应源参数也应该改变，所以很定流动相可以满足要求时，尽量不用梯度，尤其是定量时。 流动相中加入甲酸、乙酸可以提高正离子离子化效率;负离子方式分析酸性化合物时可用氨水调节PH值 常用的盐：CH3COONH4 HCOONH4 KH2PO3,色谱柱的选择,LC的流速一般根据色谱柱的规格和电离方式来确定APCI 0.2-2mL/minESI 5-300 uL /min routinely (1ml/min possible),离子化方法选择,根据样品类型确定离子化方式 适合ESI的样品类型：极性物质的检测 高极性化合物、蛋白质、肽类、低聚糖核苷酸、胺类、季铵盐 适合APCI的样品类型：弱极性、中等极性小分子 通常认为ESI有利于分析生物大分子及其它分子量大的化合物。而APCI更适合于分析极性较小的化合物,ESI谱图示例,正离子模式 M+H+ M+Na+ M+K+ 2M+H+ M+H+CH3OH+ M+NH4+ 负离子模式 M-H- M+Cl- M+OH-,Thank you for your attantion!,
