1、 诊 治 方 案 支 气 管 肺 泡 灌 洗 液 细 胞 学 检 测 技 术 规 范 （ 草 案 ）中 华 医 学 会 呼 吸 病 学 分 会支 气 管 肺 泡 灌 洗 （ !“#） 能 直 接 获 取 肺 内 炎 症 免疫 效 应 细 胞 ， 是 探 讨 肺 局 部 免 疫 病 理 过 程 的 一 种 比较 安 全 和 有 用 的 检 查 方 法 。 对 某 些 肺 疾 病 ， 特 别 是弥 漫 性 间 质 性 肺 疾 病 （ 如 特 发 性 肺 纤 维 化 、 结 节 病 、外 源 性 过 敏 性 肺 泡 炎 、 肺 泡 蛋 白 沉 积 症 、 风 湿 性 疾 病伴 肺 纤 维 化 和 #
2、$%4?% 离 心 /, 4?%， 上 清 （ 原 液 或 /, 倍浓 缩 ） 7,8储 存 ， 用 做 可 溶 性 成 分 的 检 测 。+0经 离 心 沉 淀 的 细 胞 成 分 用 9$%;A* 液 （ 不 含B$C C、 DA* 液 6 3 2 45 制 成 细 胞 悬液 。 也 可 以 应 用 灌 洗 原 液 以 减 少 细 胞 丢 失 。60在 改 良 的 EFG$F( 计 数 台 上 计 数 !“#- 中 细胞 总 数 ， 一 般 以 / H /,I# 表 示 。 如 果 细 胞 数 过 高时 ， 再 用 9$%;A* 液 稀 释 ， 调 整 细 胞 数 为 2 H /,I#，
3、并同 时 将 试 管 浸 入 碎 冰 块 中 备 用 。10细 胞 分 类 计 数 ： 采 用 细 胞 离 心 涂 片 装 置 ， 加 入备 用 细 胞 悬 液 （ 细 胞 浓 度 为 2 H /,I#） /,!5， 在 18下 以 / +, (4?% 离 心 /, 4?%， 通 过 离 心 作 用 将 一 定数 量 的 !“#- 细 胞 直 接 平 铺 于 载 玻 片 上 。 取 下 载 玻片 立 即 用 冷 风 吹 干 ， 置 于 无 水 乙 醇 中 固 定 6, 4?% 后进 行 染 色 ， 一 般 用 J(?&)K 或 9L 染 色 。20在 1, 倍 光 学 显 微 镜 下 计 数
4、+, 个 细 胞 ， 进 行细 胞 分 类 计 数 。二 、 !“#- 中 M 淋 巴 细 胞 亚 群 的 检 测/0采 用 间 接 免 疫 荧 光 法 ， 将 上 述 获 得 的 !“#-细 胞 成 分 ， 用 /,.小 牛 血 清 N *+-8，其 中 肺 泡 巨 噬 细 胞 +“ 4 ? +“ +4， 淋 巴 细 胞 +“ + ?+“+*， 中 性 和 嗜 酸 细 胞 均 = +“+*。 （ )） A 淋 巴 细 胞 亚群 ： 总 A 细 胞 （ BCD4） +“， A 辅 助 细 胞 （ BCD1） +“!， A 抑制 细 胞 （ BCDE） +“4， BCD1-BCDE比 值 *“! 0 *“E。WV“
