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免疫层析快速诊断技术.pdf

1、Lateral-Flow Diagnostic Technology免疫层析快速诊断技术-Tom Bacon (PM-BIODOT), GENE(SH Office)Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 2Tel:021-64957570胶体金技术起源及现状 起源 :1971年 ,Faulk 和 Taytor引入 现状 :1.层析法 (Lateral-Flow)2.渗滤法 (Through)3.免疫金电镜 胶体金的作用 : 指示剂Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 3Tel:021-64957570层析法技术优势 :简单 现场 快速1.打开包装取出试纸条 2.直接插入

2、待测样品中 3. 目测读出结果( 3-10分钟内)Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 4Tel:021-64957570与常规诊断方法相比:优点 缺点快速:全部检测过程仅需 3-10分钟。简便:不需其它任何仪器设备,操作也极其简单,无需专业人员,携带方便,可随时随地进行。廉价:单个测试条成本极低可单份检测:对标本既能成批检测,又可单份检测,可立刻拿到结果,不必等待。稳定性好:金标试剂稳定,可长期保存。检测标本种类多:既可用于查血,又可用于检尿或唾液,因而适合各种检查定量问题灵敏度问题Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 5Tel:021-64957570技术应用类别

3、应用领域 检测的物质人类医学 各级医院 ,血站 ,CDC,防疫站 ,诊断中心;家庭自检;商检系统;边检口岸;公安系统 .传染病 ( 乙肝五项 ,HIV, SARS等 )标志物 ( AFP、 肌钙蛋白 、 粪便血红蛋白等 )女性妊娠 ( hCG(早孕 ),LH,FSH)毒品 ( 吗啡 ,K粉 ,摇头丸 ,冰毒 )农牧业 畜牧兽医站 , 商检系统 ,边检口岸 ,农牧类院系和研究所传染病 ( 禽流感 ,兽瘟疫等 )病毒 ( 烟草花叶病毒 、 犬细小病毒等 )环境 环保监测部门 ,研究机构 有害物质超标食品安全 食品安全检测中心 ,各监管部门农兽药残留 ( 磺胺类 、 瘦肉精等 ) ,大肠杆菌 ,黄曲

4、霉素Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 6Tel:021-64957570Elements原理Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 7Tel:021-64957570试纸条组成结构测试线 ( T线)控制线( C线)胶体金垫吸水滤纸样品垫NC膜(硝酸纤维素膜)层析方向PVC底板Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 8Tel:021-64957570检测原理视频演示Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 9Tel:021-64957570免疫层析法检测原理分类介绍(双抗体夹心)(以 HCG检测为例)Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 1

5、0Tel:021-64957570免疫层析法检测原理分类介绍(竞争反应)(以吗啡检测为例)Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 11Tel:021-64957570免疫层析法检测原理分类介绍(应用 proteinA金标)(以 HIV检测为例)Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 12Tel:021-64957570TECHNOLOGY技术Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 13Tel:021-64957570技术分项 抗原抗体生物原料 标记技术 NC膜与溶液喷点 胶体金垫与溶液喷点 样品垫 吸水纸 粘性底板 干燥方法 溶液体系分析 装配 切条 包装Tom

6、Bacon, Gene Co.,LTD. 14Tel:021-64957570抗体 Antibody 来源差异 : 鼠抗 ,兔抗和羊抗 种类差异 : 单抗 ,多抗 腹水的处理 : 饱和硫酸铵沉淀法 特异性 :亲和层析柱 浓度 : 浓缩 溶解液 :不含盐 ,例如 PB抗原抗体生物原料抗原 Antigen 偶联抗原物质 : BSA, OVA等 毒品检测来源 : 合成抗原Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 15Tel:021-64957570标记技术 Conjugate 容器硅化处理 金颗粒制备 (负电 ) 颜色与颗粒的关系 .最佳标记颗粒大小 40nm. 蛋白质最适用量测定 :盐析法

7、Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 16Tel:021-64957570NC膜与溶液喷点 -NC膜 NC膜的性能 NC膜的选择爬速 (?秒 /4cm)对灵敏度的影响底衬的作用不同膜厂家的产品差异 (Whatman/S&S,Millipore,Sartorius)Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 17Tel:021-64957570NC膜与溶液喷点 -喷点溶液 Dispensing(喷点演示 :BIODOT XYZ系列喷点仪器 ) CT线溶液前处理 :1.过滤 ,0.2um孔径滤膜2.离心 1万转 10分钟 喷点过程头尾去除 ,喷点中的报废标志 CT线喷点工艺 (B

8、JQ3000喷头 )与接触划点 (FL1000XY喷头 )工艺比较Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 18Tel:021-64957570Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 19Tel:021-64957570胶体金垫与溶液喷点 胶体金垫1.材料选择2.糖的作用3.缓冲溶液的作用 喷点法与浸泡法的比较(AJQ3000喷头 )Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 20Tel:021-64957570样品垫 材料选择 各成分的作用1.缓冲溶液的作用 (PH)2.盐的作用3.大分子蛋白 BSAPVP4.表面活性剂 Tween-20,TritonX-100Tom

9、 Bacon, Gene Co.,LTD. 21Tel:021-64957570吸水纸 吸水效率 进口与国产纸的差异Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 22Tel:021-64957570粘性底板原理作用供应商的选择Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 23Tel:021-64957570干燥方法 Dry 干燥方法的比较1.冷冻干燥法 2. 烘箱 3.烘房 温湿度的控制1.温度对蛋白的影响2.湿度的控制办法Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 24Tel:021-64957570溶液体系分析 各环节缓冲溶液的选择与统一 盐的作用 表面活性剂的作用 糖的作用

10、 大分子蛋白的作用 其他作用物质Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 25Tel:021-64957570装配 切条 包装 Lamination 装配 切条(演示 :BIODOT CM4000切条机 )刀的维护与清洁底板选择 (胶的影响 ) 包装Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 26Tel:021-64957570常见技术问题解决方案TroubleshootingTom Bacon, Gene Co.,LTD. 27Tel:021-64957570解决问题的办法 批号记录 替换分析Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 28Tel:021-64957570原料效价降低 保存办法 反复复融的影响 细胞株的退化Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 29Tel:021-64957570标记问题 兔抗标记 标抗原 盐 标记沉淀 保护剂 金颗粒Tom Bacon, Gene Co.,LTD. 30Tel:021-64957570层析问题 标记复合物的颗粒沉积 活性剂 糖的作用

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