1、 分子生物学期末考试 一 名词解释1增色效应答：当 DNA 从双螺旋结构变为单链的无规则卷曲状态时，它在 260nm 处的吸收便增加，这叫“增色效应” 。2核酶答：指具有催化活性的 RNA，其作用底物是 RNA，主要参与 RNA 的加工成熟。3 DNA 半不连续复制答：指 DNA 复制时，前导链上 DNA 的合成是连续的，后随链上是不连续的，故称为半不连续复制。4 操纵子答：在转录水平上控制基因表达的协调单位，包括启动子（P） 、操纵基因（O）和在功能上相关的几个结构基因。5增强子答：指真核生物的一段 DNA 序列，不具有方向性，距离结构基因可远可近（甚至可以位于内含子） 。它与某些蛋白质因子
2、结合后，通常能够增强启动子的转录活性，有时也可以抑制转录。 6核小体答：是贪色提的基本结构单位，由 DNA 和组蛋白构成。7核糖体答：是细胞中的一种细胞器，由一大一小两个亚基结合形成 2，主要成分是相互缠绕的 RNA 和蛋白质。8启动子答：指结构基因的转录起始位点附近的一段 DNA 序列，它结合 RNA 聚合酶（真核生物还需要结合其他蛋白质因子）后能够开放基因转录。 9终止子答：是一段位于基因或操纵组末端的 DNA 片段,可中断转录作用。10 DNA 克隆答：在体外将 DNA 插入载体分子，构成重组 DNA 分子，然后将其分子导入原先没有这类分子的宿主细胞内并能够持续稳定的繁殖。二请选择正确的
3、选项1 以下哪个是核蛋白（ C ）A角蛋白B染色质C组蛋白D蛋白聚糖2DNA 中的一段 5-AGTCTGACT-3序列等同于 RNA 中的哪一段（ A ）A5-AGUCUGACU-3B5-UGTCTGUTC-3C5-UCAGUCUGA-3D5-AGUCAGACU-33DNA 解链温度是指（ B ）AA 260nm 达到最大值时的温度BA 260nm 达到最大值 50的温度CDNA 开始解链时所需要的温度DDNA 完全解链时所需要的温度41953 年 Watson 和 Crick 提出（ A ）A 多核苷酸 DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋B DNA 的复制是半保留的，常常形成亲本子代双螺旋杂
4、合链C 三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D 遗传物资通常是 DNA 而非 RNA5以下哪一个在 260nm 波长下具有最大的单位质量吸收（ A ）A双链 DNAB单核苷酸CRNAD蛋白质6pUC 系列载体是第一次利用蓝-白斑进行筛选的载体，蓝 -白斑筛选被用于（ A ）A检测外源 DNA 片段是否在细菌中表达B 检测质粒是否插入外源 DNA 片段C 检测细菌是否含有质粒D提示克隆化外源 DNA 片段的性质7.以下哪一个是大肠杆菌和真核生物染色体的共同之处（ B ）ADNA 是环状的BDNA 被包装成核小体CDNA 位于核中DDNA 是负超螺旋8反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性（摇摆）（
5、 C ）A 第一个B 第二个C 第三个D 第一个和第二个9PCR 扩增目的片段时，在第几个循环后才出现目的片段长度的双链 DNA 分子 （ B ）A第一个循环B第二个循环C第三个循环D第四个循环10原核生物中，后随链的引物是被（ C ）清除的A3至 5外切核酸酶BDNA 连接酶CDNA 聚合酶 IDDNA 聚合酶 III11.原核生物启动序列10 区的共有序列称（ A ）ATATA 盒BCAAT 盒CPribnow 盒DGC 盒12由 146bp DNA 片段，组蛋白八聚体构成的复合体称为（ A ）A核小体B核小体核心C核糖体D螺线管13人体中的脱辅基脂蛋白 B 在肝细胞中产生一个 512kD
6、a 的载脂蛋白 B100，而在肠细胞中，由于脱辅基脂蛋白 B 前 mRNA 第 6666 位的一个碱基 C 变换为U，结果产生一个终止密码子，因此在肠细胞中，脱辅基脂蛋白 B 只产生一个241kDa 的截短的载脂蛋白 B48，产生这种现象是因为（ B ）的结果ARNA 可变剪接B RNA 编辑C RNA 翻译后加工D偶然突变14某限制性内切酶酶切割 5 GGAATTCC3 序列后产生（ A ）A5 突出末端B3 突出末端C5 及 3 突出末端D平末端15原核生物的起始氨基酸是（ A ）A甲酰甲硫氨酸B 甲硫氨酸C 组氨酸D色氨酸16下面哪个结构域是 DNA 结合结构域（ C ）A螺旋-转角-
7、螺旋结构域B螺旋 -环-螺旋结构域C亮氨酸拉链D酸性激活结构域17DNA 光复活修复中哪种酶起关键作用（ A ）ADNA 光解酶B烷基转移酶CDNA 糖基化酶DAP 内切核酸酶18转化是（ A ）A细菌吸收一个质粒B细菌表达一个基因C细菌吸收一个噬菌体D从细菌中分离一个质粒19一种细菌 mRNA 由 360 个核苷酸组成，它所编码的蛋白质长度是（ D）A约 360 个氨基酸 B约 1080 个氨基酸C120 个氨基酸 D少于 120 个氨基酸20SV40 基因组是（ B ）A双链线状 DNAB双链环状 DNAC单链线状 DNAD单链环状 DNA三问答题 1.请简述遗传密码的特性答：1.方向性：
8、密码子的阅读方向是 5 到 3 端。2.简并性：除蛋氨酸和色氨酸只有一个密码子外，其它氨基酸都有好几组密码子。3.通用性：无论是病毒还是原核生物、真核生物，都共同使用一套密码字典，但有例外。4.连续性：在 mRNA 上，从起始密码子到终止密码子，密码子的排列是连续的，既没有重叠也没有间隔。5.有起始密码子和终止密码子。6.变偶性：密码的简并性只涉及第三位碱基，即同一个氨基酸的不同密码子中，前两个碱基均相同，第三个不同。2.请简要说明 cDNA 文库构建的步骤答：经典 cDNA 文库构建的基本原理：用 Oligo（dT）作逆转录引物，或者用随机引物，给所合成的 cDNA 加上适当的连接接头，连接
9、到适当的载体中获得cDNA 文库。其基本步骤包括：（1）mRNA 的提纯获取高质量的 mRNA 是构建高质量的 cDNA 文库的关键步骤之一。（2）cDNA 第一条链的合成。（3）cDNA 第二条链的合成。（4）双链 cDNA 的修饰。（5）双链 cDNA 的分子克隆。（6）cDNA文库的扩增。（7）cDNA 文库鉴定评价。3. 在色氨酸操纵子中，弱化作用是如何实现对色氨酸合成的调控答：大肠杆菌 trp operon，前导区的碱基序列包括 4 个分别以 1、2、3 和 4 表示的片段，能以两种不同的方式进行碱基配对，1 - 2 和 3 -4 配对，或 2 - 3配对,3 - 4 配对区正好位于
10、终止密码子的识别区。前导序列有相邻的两个色氨酸密码子，当培养基中 Trp 浓度很低时，负载有 Trp 的 tRNATrp 也就少，这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢，当 4 区被转录完成时，核糖体滞留 1 区，这时的前导区结构是 2 - 3 配对，不形成 3 - 4 配对的终止结构，所以转录可继续进行。反之，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在4 区被转录之前，核糖体就到达 2 区，这样使 2 - 3 不能配对，3 - 4 区可以配对形成终止子结构，转录停止。4原核生物与真核生物蛋白质合成有何异同点答：由于内质网的主要功能有糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等最主要的是糖基化
11、。而真核生物有内质网所以真核生物分泌的蛋白质基本上都被糖基化，但是原核生物中与蛋白质合成有关的细胞器只有核糖体所以原核生物中产生的蛋白质都是粗蛋白。5. 请你谈谈 RNAi 的原理及应用前景。答：1、原理: RNAi (RNA interference) 即 RNA 干涉，是近年来发现的在生物体内普遍存在的一种古老的生物学现象,是由双链 RNA（dsRNA）介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。2、应用前景：RNAi 可用于结构基因的功能研究。使用 dsRNA 研究优美新小杆线虫、黑腹果蝇（D.melanogaster）、真菌、植物等低等
12、生物基因组功能的研究已比较成熟，在较高级的哺乳动物和人类基因的功能研究中，Harborth 14 等的结果发现利用 RNAi 技术得到的基因功能表现与以往使用基因剔除法获得的信息一致。利用 RNAi 技术可以干扰病毒的复制及相应蛋白质的翻译。使用 siRNA 或 dsR-NA 进行病毒感染的干扰实验已在植物及低等生物中取得满意的结果，而且在人体细胞内的实验还刚刚起步。6.核酸具有哪些物理化学特性、光谱学和热力学特性？答: （1）化学性质酸效应 碱效应 化学变性（2）物理性质黏性 浮力密度 稳定性（3）光谱学性质减色性：dsDNA 相对于 ssDNA 是减色的，而 ssDNA 相对于 dsDNA
13、 是增色的。 DNA 纯度：A260/A280。（4）热力学性质热变性 复性：DNA 的热变性可通过冷却溶液的方法复原。不同核酸链之间的互补部分的复性称为杂交。7.真核生物 mRNA 前体如何加工成成熟的 mRNA?答：1.在专一的酶促作用下，5端形成特殊的帽子结构2.在 RNA 末端腺苷酸转移酶的作用下，在 3端添加 polA 尾巴。3.通过特殊的机制，去掉内含子，将外显子连接起来4.对链内特定的核苷酸进行甲基化修饰。8.克隆载体应具备哪些特性，并简述 DNA 克隆过程。答：1、应具备的特征：要有可转移性，已进入宿主细胞要有自主复制或者是整合功能，能携带目的基因一起稳定复制或表达要是足够大的装载量，如 plasmid 15kb YAC 400kb要有合适的筛选标记，便于筛选有合适的多克隆位点，便于目的基因的插入要足够安全2、DNA 克隆过程：一个完整的 DNA 克隆过程应包括：目的基因的获取，基因载体的选择与构建，目的基因与载体的拼接，重组 DNA 分子导入受体细胞，筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞（转化子）。
