1、三、DNA重组技术,定义,DNA重组技术是指将一个生物体内分离得到或人工合成的目的基因导入另一生物体中，使后者获得新的遗传性状或表达所需要的产物的技术。,限制性内切酶基因的剪刀,分布：主要在微生物中。 作用：一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列；并在特定的切点上切割DNA。,试,质粒,EcoRI,质粒,重播,EcoRI,质粒,DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。,质粒,运载体基因运输工具,主要作用：将外源基因送入受体细胞 原理：借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 种类,质粒、噬菌体、动植物病毒等,质粒,质粒,存在于
2、许多细菌及酵母菌等生物中 染色体外的小型环状DNA 可转移到新的宿主细胞中 能自主复制,质粒,基因工程,尝试标出下列序列受EcoRI限制酶作用的切点,小试身手:,乙DNA片段,G AATTCGGATT,CTTAA GCCTAA,质粒,基因的针线DNA连接酶,连接部位：骨架上的缺口（梯子的扶手），不是氢键（梯子的踏板）。 结果：互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。,质粒,质粒,质粒,大显身手,苏云金芽孢杆菌毒素蛋白基因能够表达产生毒素蛋白，该蛋白能毒死棉铃虫等害虫，请你用基因工程技术使棉花也能产生相应的毒素蛋白，使其具有抗虫特性。,质粒,基因工程操作的步骤,提取目的基因
3、 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达,质粒,练习,1、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶,质粒,2、基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ）A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达,C,练习,质粒,3、实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，
4、这是应用了酶的 ( ) A高效性 B专一性 C多样性 D催化活性受外界条件影响,B,练习,质粒,4、如图所示，两个核酸片段在适宜条件下，经X酶的催化作用，发生下述变化，则X酶是( )ADNA连接酶 BRNA连接酶 CDNA聚合酶 D限制酶,A,练习,质粒,5、基因工程的操作步骤：使目的基因与运载体相结合，将目的基因导人受体细胞，检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，提取目的基因，正确的操作顺序是 ( ) A B C D 13,C,练习,质粒,6、科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴生物技术基因工程，实施该工程的最终目的是( ) A定向提取生物体的DNA分子 B定向地对DNA分子进行“剪切”
5、 C在生物体外对DNA分子进行改造 D定向地改造生物的遗传性状,D,练习,质粒,7、番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成能力，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种，这种转基因番茄已于1993年在美国上市。请回答： (1)在培育转基因番茄的基因操作中，所用的基因的“剪刀”是 ，基因的“针线”是 ，基因的“运输工具”是 。 (2)进行基因操作一般要经过的四个步骤,练习,质粒,DNA连接酶,限制酶,运载体,8、不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制 （ ）B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因D、它是环状DNA,D,练习,
6、质粒,C,练习,质粒,作业,阅读学案1，完成其后的填空 尝试完成学案2,作为载体的必要条件,能自我复制 有酶切位点 有遗传标记基因 对受体细胞无害,质粒,质粒,能复制并带着插入的目的基因一起复制,有酶切位点,有标记基因的存在，将来可用含青霉素的培养基鉴别。,质粒,目的基因导入受体细胞后不能复制将会怎样？ 作为载体没有切割位点将怎样？ 目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？ 如果载体对受体细胞有害将会怎样？,基因运输工具 运载体,质粒,资料分析,基因工程可应用于哪些方面？ （1）快速高效生产药物 （2）改良作物品质 （3）基因诊断、基因治疗与环境保护,质粒,DNA重组技术的基本工具,准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） 限制性内切酶 DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） DNA连接酶 基因转移工具（“分子运输车”） 基因进入受体细胞的载体,基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具：,
